Влияние полиморфизма гена CTLA4 на вероятность развития рецидива у больных острыми лейкозами после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток

Введение. Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК) в настоящее время широко используется в терапии онкогематологических заболеваний. Отдаленные результаты алло-ТГСК напрямую зависят от способности цитотоксических Т-лимфоцитов распознавать и элиминировать остаточные опухолевые клетки. CTLA-4 – один из регуляторных белков, обеспечивающий контроль над развитием иммунного ответа. Полиморфизмы в гене CTLA4 могут влиять на его функцию и, следовательно, на эффективность противоопухолевого ответа.
Цель исследования – изучить роль несинонимического однонуклеотидного полиморфизма (нсОНП) c.49А>G в гене CTLA4 донора в контроле над опухолью у реципиентов аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (ГСК).
Материалы и методы. Доноры ГСК были генотипированы по нсОНП c.49А>G гена CTLA4 методом полимеразной цепной реакции в реальном времени с аллель-специфичными праймерами. Полученные данные проверяли секвенированием по Сэнгеру случайно выбранных 22 образцов ДНК. Общую и безрецидивную выживаемость, вероятность развития рецидива рассчитывали по методу Каплана–Майера. Для оценки различий между 2 группами использовали log-rank-тест. Значимым считали значение р <0,05.
Результаты. Частоты аллелей нсОНП c.49А>G гена CTLA4 в изученной группе 102 доноров ГСК значимо не отличались от частот, полученных проектом «1000 геномов» для европейской популяции. Влияние полиморфизма CTLA4 у донора на контроль над опухолью оценено на когорте пациентов с острыми лейкозами после проведения им алло-ТГСК от неродственного донора, совместимого по аллелям человеческого лейкоцитарного антигена (human leukocyte antigen, HLA). Показано, что в группе пациентов, ставших реципиентами ГСК от доноров, у которых полиморфизм c.49A>G находился в гомозиготном состоянии A/A, 3-летняя безрецидивная выживаемость была значимо ниже (р = 0,01) и составила 12,7 % против 62,8 % в группе с нсОНП G/G и A/G. Вероятность развития рецидива также значимо различалась для группы с A/A и группы с G/G и A/G вариантами c.49A>G и составила 83,7 и 29,3 % соответственно (р = 0,03).
Заключение. Пациенты с острыми лейкозами, ставшие реципиентами аллогенных неродственных полностью HLA-совместимых ГСК с генотипами G/G или A/G полиморфизма CTLA4 c.49А>G, имеют значимо более низкий риск возникновения рецидива, чем пациенты, перенесшие трансплантацию от доноров с генотипом A/A. Это указывает на целесообразность генотипирования по данному полиморфизму для подбора оптимального донора.

1. Kolb H.J. Graft-versus-leukemia effects of transplantation and donor lymphocytes. Blood 2008;112(12):4371–83. DOI: 10.1182/blood-2008-03-077974. PMID: 19029455.

2. Shlomchik W.D. Graft-versus-host disease. Nat Rev Immunol 2007;7(5): 340–52. DOI: 10.1038/nri2000. PMID: 17438575.

3. Karandikar N.J., Vanderlugt C.L., Walunas T.L. et al. CTLA-4: a negative regulator of autoimmune disease. J Exp Med 1996;184(2):783–8. DOI: 10.1084/jem.184.2.783. PMID: 8760834.

4. van der Merwe P.A., Bodian D.L., Daenke S. et al. CD80(B7-1) binds both CD28 and CTLA-4 with a low affinity and very fast kinetics. J Exp Med 1997;185(3):393–403. DOI: 10.1084/jem.185.3.393. PMID: 9053440.

5. Krummel M.F., Allison J.P. CTLA-4 engagement inhibits IL-2 accumulation and cell cycle progression upon activation of resting T cells. J Exp Med 1996;183(6):2533–40. DOI: 10.1084/jem.183.6.2533. PMID: 8676074.

6. Kouki T., Sawai Y., Gardine C.A. et al. CTLA-4 gene polymorphism at position 49 in exon 1 reduces the inhibitory function of CTLA-4 and contributes to the pathogenesis of Graves’ disease. J Immunol 2000;165(11):6606–11. DOI: 10.4049/jimmunol.165.11.6606. PMID: 11086105.

7. Ligers A., Teleshova N., Masterman T. et al. CTLA-4 gene expression is influenced by promoter and exon 1 polymorphisms. Genes Immun 2001;2(3):145–52. DOI: 10.1038/sj.gene.6363752. PMID: 11426323.

8. Anjos S., Nguyen A., Ounissi-Benkalha H. et al. A common autoimmunity predisposing signal peptide variant of the cytotoxic T-lymphocyte antigen 4 results in inefficient glycosylation of the susceptibility allele. J Biol Chem 2002;277(48):46478–86. DOI: 10.1074/jbc.M206894200. PMID: 12244107.

9. Chistiakov D.A., Savost’anov K. V., Turakulov R.I. et al. Genetic analysis and functional evaluation of the C/T(-318) and A/G(-1661) polymorphisms of the CTLA-4 gene in patients affected with Graves’ disease. Clin Immunol 2006;118(2–3):233–42. DOI: 10.1016/j.clim.2005.09.017. PMID: 16297665.

10. Monne M., Piras G., Palmas A. et al. Cytotoxic T-lymphocyte antigen-4 (CTLA-4) gene polymorphism and susceptibility to non-Hodgkin’s lymphoma. Am J Hematol 2004;76(1):14–8. DOI: 10.1002/ajh.20045. PMID: 15114591.

11. Ueda H., Howson J.M. M., Esposito L. et al. Association of the T-cell regulatory gene CTLA4 with susceptibility to autoimmune disease. Nature 2003;423(6939): 506–11. DOI: 10.1038/nature01621. PMID: 12724780.

12. Donner H., Rau H., Walfish P.G. et al. CTLA4 alanine-17 confers genetic susceptibility to Graves’ disease and to type 1 diabetes mellitus. J Clin Endocrinol Metab 1997;82(1):143–6. DOI: 10.1210/jcem.82.1.3699. PMID: 8989248.

13. Gonzalez-Escribano M.F., Rodriguez R., Valenzuela A. et al. CTLA4 polymorphisms in Spanish patients with rheumatoid arthritis. Tissue Antigens 1999;53(3):296–300. DOI: 10.1034/j.1399-0039.1999.530311.x. PMID: 10203024.

14. Hudson L.L., Rocca K., Song Y.W. et al. CTLA-4 gene polymorphisms in systemic lupus erythematosus: a highly significant association with a determinant in the promoter region. Hum Genet 2002;111(4–5): 452–5. DOI: 10.1007/s00439-002-0807-2. PMID: 12384790.

15. Gallardo D., Bosch-Vizcaya A., Rodríguez-Romanos R. et al. Donor CTLA-4 genotype modulates the immune response to minor histocompatibility antigen mismatches. Biol Blood Marrow Transplant 2017;23(12):2042–7. DOI: 10.1016/j.bbmt.2017.08.003. PMID: 28827064.

16. Azarian M., Busson M., Lepage V. et al. Donor CTLA-4 +49 A/G*GG genotype is associated with chronic GVHD after HLA-identical haematopoietic stem-cell transplantations. Blood 2007;110(13):4623–4. DOI: 10.1182/blood-2007-08-106385. PMID: 18056853.

17. Pérez-García A., la Cámara R.D., Román-Gómez J. et al. CTLA-4 polymorphisms and clinical outcome after allogeneic stem cell transplantation from HLA-identical sibling donors. Blood 2007;110(1):461–7. DOI: 10.1182/blood-2007-01-069781. PMID: 17384200.

18. Mohty M., Bay J.O., Faucher C. et al. Graft-versus-host disease following allogeneic transplantation from HLA-identical sibling with antithymocyte globulin-based reduced-intensity preparative regimen. Blood 2003;102(2):470–6. DOI: 10.1182/blood-2002-12-3629. PMID: 12649133.

19. Pascal L., Tucunduva L., Ruggeri A. et al. Impact of ATG-containing reduced-intensity conditioning after single- or doubleunit allogeneic cord blood transplantation. Blood 2015;126(8):1027–32. DOI: 10.1182/blood-2014-09-599241. PMID: 26160301.

20. Russell J.A., Turner A.R., Larratt L. et al. Adult recipients of matched related donor blood cell transplants given myeloablative regimens including pretransplant antithymocyte globulin have lower mortality related to graft-versus-host disease: a matched pair analysis. Biol Blood Marrow Transplant 2007;13(3):299–306. DOI: 10.1016/j.bbmt.2006.10.017. PMID: 17317583.

21. Warren E.H., Zhang X.C., Li S. et al. Effect of MHC and non-MHC donor/ recipient genetic disparity on the outcome of allogeneic HCT. Blood 2012;120(14): 2796–806. DOI: 10.1182/blood-2012-04-347286. PMID: 22859606.

22. Боголюбова А.В., Ефимов Г.А., Друцкая М.С., Недоспасов С.А. Иммунотерапия опухолей, основанная на блокировке иммунологических контрольных «точек» («чекпойнтов»). Медицинская иммунология 2015;17(5):395–406. DOI: 10.15789/1563-0625-2015-5-395-406. [Bogolyubova A.V., Efimov G.A., Drutskaya M.S., Nedospasov S.A. Cancer immunotherapy based on the blockade of immune checkpoints. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology 2015;17(5):395–406. (In Russ.)].

23. Ijaz A., Khan A.Y., Malik S.U. et al. Significant risk of graft-versus-host disease with exposure to checkpoint inhibitors before and after allogeneic transplantation. Biol Blood Marrow Transplant 2019;25(1):94–9. DOI: 10.1016/j.bbmt.2018.08.028. PMID: 30195074.