Динамика субпопуляционного состава Т-клеток у больных апластической анемией в процессе иммуносупрессивной терапии

Введение. Апластическая анемия (АА) – неопухолевое и редко встречающееся заболевание системы крови, характеризующееся глубокой панцитопенией вследствие развития аплазии костного мозга при иммуноопосредованном повреждении пула гемопоэтических стволовых клеток. Результаты исследований указывают на наличие антигенного воздействия, приводящего к патологической активации и дисрегуляции Т-клеточного звена в костном мозге с повышенной продукцией провоспалительных цитокинов, повреждающих гемопоэтические стволовые клетки. Пусковой фактор, запускающий каскад иммунных реакций, на сегодняшний день не известен. Высокая эффективность иммуносупрессивной терапии (ИСТ), позволяющей достичь ремиссии у большинства больных АА, является свидетельством иммунного генеза заболевания. Патогенез АА в настоящее время активно изучается. Участие субпопуляций Т-клеток в процессах иммунного ответа не вызывает сомнений, однако вопросы их значения в патогенезе АА до конца не изучены. Более детальное понимание механизмов развития АА необходимо при разработке долгосрочного эффективного лечения.

Цель исследования – изучить субпопуляционный состав Т-клеток больных АА в костном мозге в процессе ИСТ.

Материалы и методы. В исследование был включен 41 больной старше 18 лет с впервые приобретенной АА без предшествующей ИСТ. Лечение проводилось по протоколу, включающему лошадиный антитимоцитарный глобулин и циклоспорин. Для детекции субпопуляций Т-клеток использовался метод проточной цитометрии. Исследование костного мозга проводилось в 3 точках: дебют, через 3 и 6 мес после начала комбинированной ИСТ.

Результаты. Разнонаправленные изменения соотношения субпопуляций Т-клеток до начала ИСТ были обнаружены у всех больных АА, включенных в проспективное исследование: у большинства больных выявлялась большая доля эффекторных CD4⁺- и CD8⁺-Т-клеток (у 61 и 83 % больных соответственно), СD4⁺-Т-клеток памяти (у 63 % больных) и меньшая доля наивных CD4⁺- и CD8⁺-Т-клеток (у 81 и 51 % больных соответственно) по сравнению с донорами (p <0,05). Нарушения соотношения субпопуляций Т-клеток, обусловливающие аномальный иммунный ответ, наиболее выражены при сверхтяжелой форме АА. При ответе на лечение у больных не обнаружено достоверных изменений в субпопуляционном составе Т-клеток ни до начала ИСТ, ни через 6 мес после по сравнению с донорами. При отсутствии ответа на лечение выявлена большая доля эффекторных CD4⁺- и CD8⁺-Т-клеток, СD4⁺-Т-клеток памяти и меньшая доля наивных CD4⁺- и CD8⁺-Т-клеток по сравнению с донорами уже до начала ИСТ (p <0,05). Из всех цитометрических параметров была получена достоверная связь между динамикой эффекторных CD8⁺-Т-клеток и ответом на лечение (р = 0,040). Количество этих клеток в дебюте и контрольных точках достоверно коррелировало с ответом на ИСТ. У больных, у которых не получено ответа на лечение к 3-му месяцу от начала ИСТ, происходит дальнейший рост количества эффекторных CD8⁺-Т-клеток, несмотря на продолжение ИСТ, что диктует необходимость усиления и интенсификации ИСТ в кратчайшие сроки (между 3-м и 6-м месяцами) у этих больных, а именно проведения 2-го курса лошадиным антитимоцитарным глобулином и продолжения терапии циклоспорином либо рассмотрения в частном порядке вопроса об альтернативном лечении (аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток).

Заключение. Изучение динамики субпопуляционного состава Т-клеток, в частности эффекторных Т-клеток, позволяет определиться с тактикой дальнейшего лечения на ранних сроках ИСТ в целях подбора оптимальной программы лечения для каждого больного АА.

1. Bacigalupo A. How I treat acquired aplastic anemia. Blood 2017;129(11):1428–36. DOI: 10.1182/blood-2016-08-693481

2. Dokal I., Vulliamy Т. Inherited aplastic anaemias/bone marrow failure syndromes. Blood Rev 2008;22(3):141–53. DOI: 10.1016/j.blre.2007.11.003

3. Shallis R.M., Ahmad A.M., Zeidan R. Aplastic anemia: etiology, molecular pathogenesis, and emerging concepts. Eur J Haematol 2018;101(6):711–20. DOI: 10.1111/ejh.13153

4. Young N.S., Calado R.T., Scheinberg P. Current concepts in the pathophysiology and treatment of aplastic anemia. Blood 2006;108(8):2509–19. DOI: 10.1182/blood-2006-03-010777

5. Willinger T., Freeman Т., Hasegawa Н. et al. Molecular signatures distinguish human central memory from effector memory CD8 T cell subsets. J Immunol 2015;175(9):5895–903. DOI: 10.4049/jimmunol.175.9.5895

6. Lanzavecchia A., Sallusto F. Understanding the generation and function of memory T cell subsets. Curr Opin Immunol 2005;17(3):326–32. DOI: 10.1016/j.coi.2005.04.010

7. Zhu J. T-helper cell differentiation, heterogeneity, and plasticity. Cold Spring Harb Perspect Biol 2018;10(10):1–18с. DOI: 10.1101/cshperspect.a030338

8. Shi J., Ge M., Lu S. et al. Intrinsic impairment of CD4(+)CD25(+) regulatory T cells in acquired aplastic anemia. Blood 2012;120(8):1624–32. DOI: 10.1182/blood-2011-11-390708

9. Young K.J., Zhang L. The Nature and mechanisms of DN regulatory T-cell mediated suppression. Hum Immunol 2002;63(10):926–34. DOI: 10.1016/s0198-8859(02)00446-9

10. Zhang Z., Ma Y., Wang H. et al. Double-negative T cells, activated by xenoantigen, lyse autologous B and T cells using a perforin. Granzyme-dependent, Fas-Fas ligand-independent pathway. J Immunol 2016;177(10):6920–9. DOI: 10.4049/jimmunol.177.10.6920

11. Bacigalupo A. Antithymocyte globulin and cyclosporin: standard of care for older patients with aplastic anemia. Haematologica 2019;104(2):215–6. DOI: 10.3324/haematol.2018.207167

12. Михайлова Е.А., Фидарова З.Т., Устинова Е.Н. и др. Комбинированная иммуносупрессивная терапия больных апластической анемией: эффективность повторных курсов антитимоцитарного глобулина. Гематология и трансфузиология 2014;50(7):11–8.

13. Михайлова Е.А., Фидарова З.Т., Абрамова А.В. и др. Иммуносупрессивная терапия больных апластической анемией: успехи и неудачи (одноцентровое исследование 2007–2016 гг.). Терапевтический архив 2020;92(7):4–9. DOI: 10.26442/00403660.2020.07.000756

14. Михайлова Е.А., Фидарова З.Т., Троицкая В.В. и др. Клинические рекомендации по диагностике и лечению апластической анемии (редакция 2019 г.). Гематология и трансфузиология 2020;65(2):208–26. DOI: 10.35754/0234-5730-2020-65-2-208-226

15. Абрамова А.В., Гальцева И.В., Михайлова Е.А. и др. Олигоклональность и субпопуляционный состав Т-клеток костного мозга у больных апластической анемией. Гематология и трансфузиология 2020;65(4):417–30. DOI: 10.35754/0234-5730-2020-65-4-417-430