Анализ вариантов нестабильности микросателлитных повторов и потери гетерозиготности у пациентов с фолликулярной лимфомой, диффузной B-клеточной крупноклеточной лимфомой и B-клеточной лимфомой высокой степени злокачественности

Введение. Изучение генетических предикторов течения неходжкинских лимфом является одним из актуальных направлений онкогематологии. Крайне интересным представляется поиск значимых маркеров, отражающих важнейшие этапы патогенеза опухоли. Одну из ключевых ролей в развитии нестабильности генома играют дефекты систем репарации. Нарушения микросателлитных повторов по типу микросателлитной нестабильности (microsatellite instability, MSI), в частности аберраций микросателлитных тетрануклеотидных повторов (elevated microsatellite alterations at selected tetranucleotide repeats, EMAST), характерны для дефицита системы репарации ошибочно спаренных нуклеотидов. Анализ микросателлитного профиля также позволяет детектировать потерю гетерозиготности (loss of heterozygosity, LOH). Феномен LOH является интегральным отражением нестабильности генома.
Цель исследования – анализ значения MSI, в частности EMAST, и LOH при фолликулярной лимфоме (ФЛ), диффузной B-клеточной крупноклеточной лимфоме (ДВККЛ) и B-клеточной лимфоме высокой степени злокачественности (ВКЛВСЗ).
Материалы и методы. Исследование было выполнено методом мультиплексной полимеразной цепной реакции и последующего фрагментного анализа с использованием диагностических панелей COrDIS Plus и COrDIS MSI у 85 пациентов с ФЛ, у 32 пациентов с ДВККЛ и у 37 пациентов с ВКЛВСЗ.
Результаты. В общей группе ФЛ частота LOH составила 40/81 (49,4 %), MSI – 10/82 (12,2 %), EMAST – 15/81 (18,5 %). В группе ВКЛВСЗ частота LOH составила 21/31 (67,8 %), MSI – 11/37 (29,7 %), EMAST – 13/31 (41,9 %). В группе ДВККЛ частота LOH составила 18/29 (62,0 %), MSI – 5/32 (15,6 %), EMAST – 14/32 (43,8 %). При рассмотрении морфологических типов ФЛ было отмечено, что более высокая частота генетических аберраций была характерна для лимфом с морфологией, соответствующей более агрессивным формам (p <0,05). Исследование LOH позволяет выделить группу пациентов с неблагоприятным прогнозом ФЛ и ВКЛВСЗ. Анализ EMAST позволяет дополнительно выявить в когорте LOH+ больных с низкой бессобытийной выживаемостью.
Заключение. LOH и EMAST обладают прогностическим значением при ФЛ и ВКЛВСЗ. При ДВККЛ ассоциации LOH и EMAST с выживаемостью не отмечено. Изменения мононуклеотидных повторов при ФЛ, ДВККЛ и ВКЛВСЗ не соответствовали феномену MSI-H (высокий уровень MSI), характерному для синдрома Линча и подобных ему опухолей. По этой причине нельзя ожидать воспроизведения клинических следствий MSI-H в случае солидных новообразований, в частности эффективности ингибиторов иммунных контрольных точек, при лимфомах исключительно на основании выявления аберраций микросателлитов.

1. Ionov Y., Peinado M.A., Malkhosyan S. et al. Ubiquitous somatic mutations in simple repeated sequences reveal a new mechanism for colonic carcinogenesis. Nature 1993;363(6429):558–61. DOI:10.1038/363558a0.

2. Boland C.R., Goel A. Microsatellite instability in colorectal cancer. Gastroenterology 2010;138(6):2073–87.e3. DOI:10.1053/j.gastro.2009.12.064.

3. Ballhausen A., Przybilla M.J., Jendrusch M. et al. The shared frameshift mutation landscape of microsatelliteunstable cancers suggests immunoediting during tumor evolution. Nat Commun 2020;11(1):4740. DOI:10.1038/s41467-020-18514-5.

4. Gryfe R., Kim H., Hsieh E.T. et al. Tumor microsatellite instability and clinical outcome in young patients with colorectal cancer. N Engl J Med 2000;342(2):69–77. DOI:10.1056/NEJM200001133420201.

5. Oliveira A.F., Bretes L., Furtado I. Review of PD-1/PD-L1 inhibitors in metastatic dMMR/MSI-H colorectal cancer. Front Oncol 2019;9:396. DOI:10.3389/fonc.2019.00396.

6. Boland C.R., Thibodeau S.N., Hamilton S.R. et al. A National Cancer Institute Workshop on Microsatellite Instability for cancer detection and familial predisposition: development of international criteria for the determination of microsatellite instability in colorectal cancer. Cancer Res 1998;58(22):5248–57.

7. Carethers J.M. Microsatellite instability pathway and EMAST in colorectal cancer. Curr Colorectal Cancer Rep 2017;13(1):73–80. DOI:10.1007/s11888-017-0352-y.

8. Carethers J.M., Koi M., Tseng-Rogenski S.S. EMAST is a form of microsatellite instability that is initiated by inflammation and modulates colorectal cancer progression. Genes (Basel) 2015;6(2):185–205. DOI:10.3390/genes6020185.

9. Torshizi Esfahani A., Seyedna S.Y., Nazemalhosseini Mojarad E. et al. MSI-L/EMAST is a predictive biomarker for metastasis in colorectal cancer patients. J Cell Physiol 2019;234(8):13128–36. DOI:10.1002/jcp.27983.

10. Murthy S.K., DiFrancesco L.M., Ogilvie R.T., Demetrick D.J. Loss of heterozygosity associated with uniparental disomy in breast carcinoma. Mod Pathol 2002;15(12):1241–50. DOI:10.1097/01.MP.0000032535.62750.D1.

11. Heidenreich E., Novotny R., Kneidinger B. et al. Non-homologous end joining as an important mutagenic process in cell cycle-arrested cells. EMBO J 2003;22(9):2274–83. DOI:10.1093/emboj/cdg203.

12. Randerson J., Cawkwell L., Jack A. et al. Microsatellite instability in follicle centre cell lymphoma. Br J Haematol 1996;93(1):160–2. DOI:10.1046/j.1365-2141.1996.456994.x.

13. Gamberi B., Gaidano G., Parsa N. et al. Microsatellite instability is rare in B-cell non-Hodgkin’s lymphomas. Blood 1997;89(3):975–9.

14. Nagy M., Balázs M., Adám Z. et al. Genetic instability is associated with histological transformation of follicle center lymphoma. Leukemia 2000;14(12):2142–8. DOI:10.1038/sj.leu.2401978.

15. Miyashita K., Fujii K., Yamada Y. et al. Frequent microsatellite instability in non-Hodgkin lymphomas irresponsive to chemotherapy. Leuk Res 2008;32(8):1183–95. DOI:10.1016/j.leukres.2007.11.024.

16. Tian T., Li J., Xue T. et al. Microsatellite instability and its associations with the clinicopathologic characteristics of diffuse large B-cell lymphoma. Cancer Med 2020;9(7):2330–42. DOI:10.1002/cam4.2870.

17. Сидорова Ю.В., Сорокина Т.В., Бидерман Б.В. и др. Определение минимальной остаточной болезни у больных В-клеточным хроническим лимфолейкозом методом пациентспецифичной ПЦР. Клиническая лабораторная диагностика 2011:12:22–4.

18. Sidorova J.V., Biderman B.V., Nikulina E.E., Sudarikov A.B. A simple and efficient method for DNA extraction from skin and paraffin – embedded tissues applicable to T-cell clonality assays. Exp Dermatol 2012;21(1):57–60. DOI:10.1111/j.1600-0625.2011.01375.x.

19. Van Dongen J.J., Langerak A.W., Brüggemann M. et al. Design and standardization of PCR primers and protocols for detection of clonal immunoglobulin and T-cell receptor gene recombinations in suspect lymphoproliferations: report of the BIOMED­2 Concerted Action BMH4-CT98–3936. Leukemia 2003;17(12):2257–317. DOI:10.1038/sj.leu.2403202.

20. Смирнова С.Ю., Сидорова Ю.В., Рыжикова Н.В. и др. Эволюция опухолевых клонов при остром лимфобластном лейкозе взрослых. Acta Naturae 2016;8:108–17.

21. Fishel R., Kolodner R.D. Identification of mismatch repair genes and their role in the development of cancer. Curr Opin Genet Dev 1995;5(3):382–95. DOI:10.1016/0959-437x(95)80055-7.

22. Miyaki M., Konishi M., Tanaka K. et al. Germline mutation of MSH6 as the cause of hereditary nonpolyposis colorectal cancer. Nat Genet 1997;17(3):271–2. DOI:10.1038/ng1197-271.

23. Kane M.F., Loda M., Gaida G.M. et al. Methylation of the hMLH1 promoter correlates with lack of expression of hMLH1 in sporadic colon tumors and mismatch repair-defective human tumor cell lines. Cancer Res 1997;57(5):808–11.

24. Haugen A.C., Goel A., Yamada K. et al. Genetic instability caused by loss of MutS homologue 3 in human colorectal cancer. Cancer Res 2008;68(20):8465–72. DOI:10.1158/0008-5472.CAN-08-0002.

25. Umar A., Boland C.R., Terdiman J.P. et al. Revised Bethesda Guidelines for hereditary nonpolyposis colorectal cancer (Lynch syndrome) and microsatellite instability. J Natl Cancer Inst 2004;96(4):261–8. DOI:10.1093/jnci/djh034.

26. Duval A., Rolland S., Compoint A. et al. Evolution of instability at coding and non-coding repeat sequences in human MSI-H colorectal cancers. Hum Mol Genet 2001;10(5):513–8. DOI:10.1093/hmg/10.5.513.

27. Paraskakis E., Sourvinos G., Passam F. et al. Microsatellite DNA instability and loss of heterozygosity in bronchial asthma. Eur Respir J 2003;22(6):951–5. DOI:10.1183/09031936.03.00010503.

28. Spandidos D.A., Ergazaki M., Arvanitis D., Kiaris H. Microsatellite instability in human atherosclerotic plaques. Biochem Biophys Res Commun 1996;220(1):137–40. DOI:10.1006/bbrc.1996.0370.

29. Chizhikov V., Chikina S., Gasparian A. et al. Cancer-associated molecular alterations in bronchial epithelium of former Chernobyl cleanup workers in comparison with smokers and nonsmokers without ionizing radiation exposure. Eur J Cancer 2001;37(6):153. DOI:10.1016/s0959-8049(01)81050-9.

30. Vieira M.L., Santini L., Diniz A.L., Munhoz Cde F. Microsatellite markers: what they mean and why they are so useful. Genet Mol Biol 2016;39(3):312–28. DOI:10.1590/16784685-GMB-2016-0027.

31. Wafa A., Moassass F., Liehr T. et al. A high complex karyotype involving eleven chromosomes including three novel chromosomal aberrations and monoallelic loss of TP53 in case of follicular lymphoma transformed into B-cell lymphoblastic leukemia. Mol Cytogenet 2016;9:91. DOI:10.1186/s13039-016-0300-6.

32. Cohen J.B., Ruppert A.S., Heerema N.A. et al. Complex karyotype is associated with aggressive disease and shortened progression-free survival in patients with newly diagnosed mantle cell lymphoma. Clin Lymphoma Myeloma Leuk 2015;15(5):278–85.e1. DOI:10.1016/j.clml.2014.12.012.

33. Tilly H., Rossi A., Stamatoullas A. et al. Prognostic value of chromosomal abnormalities in follicular lymphoma. Blood 1994;84(4):1043–9.

34. Casulo C., Byrtek M., Dawson K.L. et al. Early relapse of follicular lymphoma after rituximab plus cyclophosphamide, doxorubicin, vincristine, and prednisone defines patients at high risk for death: an analysis from the National LymphoCare Study. J Clin Oncol 2015;33(23):2516–22. DOI:10.1200/JCO.2014.59.7534.

35. Solal-Céligny P., Roy P., Colombat P. et al. Follicular lymphoma international prognostic index. Blood 2004;104(5):1258–65. DOI:10.1182/blood-2003-12-4434.

36. Federico M., Bellei M., Marcheselli L. et al. Follicular lymphoma international prognostic index 2: a new prognostic index for follicular lymphoma developed by the international follicular lymphoma prognostic factor project. J Clin Oncol 2009;27(27):4555–62. DOI:10.1200/JCO.2008.21.3991.

37. Pastore A., Jurinovic V., Kridel R. et al. Integration of gene mutations in risk prognostication for patients receiving firstline immunochemotherapy for follicular lymphoma: a retrospective analysis of a prospective clinical trial and validation in a population-based registry. Lancet Oncol 2015;16(9):1111–22. DOI:10.1016/S1470-2045(15)00169-2.

38. Багова М.О., Магомедова А.У., Кравченко С.К. и др. Фармакоэкономический анализ комбинированной иммунохимиотерапии R-DA-EPOCH и R-MNHL-BFM-90 у пациентов с прогностически неблагоприятной диффузной В-крупноклеточной лимфомой в рамках многоцентрового клинического исследования ДВККЛ-2015. Клиническая онкогематология 2021;14(3):321–32. DOI:10.21320/2500-21392021-14-3-321-332.

39. Магомедова А.У., Сычевская К.Н., Моисеева Т.Н. и др. Промежуточные результаты многоцентрового, рандомизированного, контролируемого (сравнительного) открытого, проспективного исследования по оценке эффективности программ R-DA-EPOCH-21, R-mNHL-BFM-90 и трансплантации аутологичных стволовых кроветворных клеток у нелеченых больных диффузной В-клеточной крупноклеточной лимфой с признаками неблагоприятного прогноза – протокол ДВККЛ-2015. Гематология и трансфузиология 2020;65(S1):35.