Выявление распространенных и новых редких типов сл абого антигена RhD у больных с заболеваниями системы крови и здоровых лиц

Введение. Фенотип системы Резус определен у 404 лиц с проблемами в идентификации групповой принадлежности. Генетическое типирование вариантов антигена RhD выполнено 73 индивидуумам.

Цель исследования – дать молекулярно-серологическую характеристику слабых вариантов антигена RhD системы Резус.

Материалы и методы. Использовали следующие методы: метод определения резус-фенотипа в прямой агглютинации на плоскости с применением Цоликлонов анти-D, анти-С, анти-с, анти-Сw, анти-Е и анти-e; гелевый метод определения резус-фенотипа; методы генетического типирования антигена RhD; методы определения антигена RhD в непрямой пробе Кумбса в классическом варианте и в геле; метод определения антигена RhD в агглютинации в солевой среде.

Результаты. Серологическими методами выявлено 73 образца эритроцитов с ослабленным антигеном RhD. Молекулярными методами определены причины ослабления экспрессии антигена: идентифицировано 3 типа слабого антигена RhD, часто встречающихся у россиян (RHD*D weak type 1–3), и впервые выявлены еще 3 типа – RHD*D weak type 67, RHD(G255R) и RHD(JVS538del4). Дана серологическая характеристика разных типов слабого антигена RhD. Показано, что предположить присутствие вариантных антигенов можно по расхождению результатов в методах прямой агглютинации с Цоликлонами и в геле. Эритроциты со слабыми антигенами RhD можно распознать по ослаблению или отсутствию агглютинации с Цоликлоном анти-D и силе реакции в гелевом методе на 3+…4+.

Заключение. Конкретные типы слабого антигена RhD могут быть установлены только при генетическом исследовании. Серологически слабые варианты антигенов могут быть выявлены при использовании моноклональных антител как минимум 2 серий или, что предпочтительнее, применением 2 разных методик.

1. Scott M.L. The complexities of the Rh system. Vox Sang 2004;87(suppl. 1):S58‒62. DOI: 10.1111/j.1741-6892.2004.00431.x

2. Beckers E.A., Faas B.H., von der Borne A.E. et al. The R0Har Rh:33 phenotype results from substitution of exon 5 of the RHCE gene by corresponding exon of the RHD gene. Br J Haematol 1996;92(3):751‒7. DOI: 10.1046/j.1365-2141.1996.382918.x.

3. Scott M. Section 1A. Rh serology. Coordinator’s report. Transfus Clin Biol 2002;9(1):23–9. DOI: 10.1016/S12467820(01)00211-7.

4. Daniels G. Variants of RhD – current testing and clinical consequences. Br J Haematol 2013;161(4):461‒70. DOI: 10.1111/bjh.12275.

5. Kwon D.H., Sandler S.G., Flegel W.A. DEL phenotype. Immunohematology 2017;33(3):125‒32.

6. Stratton F. A new Rh allelomorph. Nature 1946;158:25‒6. DOI: 10.1038/158025c0.

7. Agre P.C., Davies D.M., Issit P.D. et al. A proposal to standardize terminology for weak D antigen. Transfusion 1992;32(1):86‒7. DOI: 10.1046/j.1537-2995.1992.32192116441.x.

8. Rhesus base website, http://www.uniulm.de/fwagner/RH/RB.

9. Wagner F.F., Gassner C., Muller T.H. et al. Molecular basis of weak D phenotypes. Blood 1999;93(1):385‒93.

10. Avent N.D., Madgett T.E., Lee Z.E. et al. Molecular biology of Rh protein and relevance to molecular medicine. Expert Rev Mol Med 2006;8(13):1‒20. DOI: 10.1017/S1462399406010969.

11. Wagner F.F., Frohmajer A., Ladewig B. et al. Weak D alleles express distinct phenotypes. Blood 2000;95(8):2699–708. DOI: 10.1016/S0887-7963(01)80057-2.

12. Wagner F.F., Flegel W.A. RHD gene deletion occurred in the Rhesus box. Blood 2000;95(12):3662‒8. DOI: 10.1016/S08877963(01)80058-4.

13. Flegel W.A., Wagner F.F. Molecular genetics of RH. Vox Sang 2000;78(Suppl 2):109‒15.

14. Flegel W.A., von Zabern I., Doescher A. et al. D variants at the RhD vestibule in the weak D type 4 and Eurasian D clusters. Transfusion 2009;49(6):1059‒69. DOI: 10.1111/j.1537-2995.2009.02102.x.

15. Wagner F.F., Ladewig B., Angert K.S. et al. The DAU allele cluster of the RHD gene. Blood 2002;100(1):306‒11. DOI: 10.1182/blood-2002-01-0320.

16. Wagner T., Kormoczi G.F., Buchta C. et al. Anti-D immunization by DEL red blood cells. Transfusion 2005;45(4):520‒6. DOI: 10.1111/j.0041-1132.2005.04256.x.

17. Dogic V., Bingulac-Popovic J., Babic I. et al. Distribution of weak D types in Croation population. Transfus Med 2011;21(4):278‒9. DOI: 10.1111/j.1365-3148.2011.01071.x.

18. Rodrigues M.J., Rodrigues F., Tilley L. et al. Several new examples of weak D type 38 in the Portuguese population. Transfusion 2006;46(suppl.):141A‒2A (abstract). DOI: 10.1111/j.1537-995.2006.01023_1.x.

19. St-Louis M., Richard M., Cote M. et al. Weak D type 42 cases found in individuals of European descent. Immunohematology 2011;27(1):20‒4.

20. Головкина Л.Л., Стремоухова А.Г., Пушкина Т.Д. и др. Молекулярносерологические характеристики типов слабого антигена D системы Резус. Терапевтический архив 2016;88:78‒83. DOI: 10.17116/terarkh201688778-83.

21. Головкина Л.Л., Стремоухова А.Г., Пушкина Т.Д. и др. Случай выявления антигена системы Резус – Dweak 15-го типа. Гематология и трансфузиология 2014;59(4):23‒4.

22. Головкина Л.Л., Стремоухова А.Г., Пушкина Т.Д. и др. Случай выявления антигена weak D type 4.2 (категория DAR) системы Резус. Онкогематология 2015;10(3):70‒2. DOI: 10.17650/18188346-2015-10-3-70-72.

23. Wagner T., Koermoeczi G.F., Buchta G. et al. Anti-D immunization by DEL red blood cells. Transfusion 2005;45(4):520‒6. DOI: 10.1111/j.0041-1132.2005.04256.x.

24. Mollison P.L., Engelfriet C.P., Contreras M. Blood transfusion in clinical medicine. 10th edn. Oxford: Blackwell Science, 1997.

25. von Zabern I., Flegel W.A. IVS5-38del4 deletion in the RHD gene does not cause a DEL phenotype: relevance for RHD alleles including DFR-3. Transfusion 2007;47(8):1552‒5. DOI: 10.1111/j.1537-2995.2007.01353.x.

26. Fichou Y., Le Marechal C., Jamet D. et al. Establishment of a medium-throughput approach for the genotyping of RHD variants and report of nine novel rare alleles. Transfusion 2013;53(8):1821‒8. DOI: 10.1111/trf.12009.

27. Sandler S.G., Flegel W.A., Westhoff C.M. et al. It’s time to phase in RHD genotyping for patients with serologic weak D phenotype. Transfusion 2015;55(3):680‒9. DOI: 10.1111/trf.12941.

28. Standards for blood banks and transfusion service. 29th edn. Ed.: J. Levitt. Bethesda (MD): American Association of Blood Banks, 2014.