Детекция тромбоцитассоциированных иммуноглобулинов и компонентов системы комплемент а у больных апластической анемией и гемобластозами

Введение. При развитии иммунологической рефрактерности к трансфузиям донорских тромбоцитов наряду с антитромбоцитарными (анти-HLA и анти-HPA) аллоантителами, а также специфическими цитотоксическими Т-лимфоцитами могут вырабатываться дополнительные маркеры, такие как тромбоцитассоциированные иммуноглобулины (PAIgG / M / A) и компоненты системы комплемента (PAC3 / C4), что может способствовать повышенному разрушению тромбоцитов при трансфузиях и усугублять рефрактерность. Эти маркеры можно выявить с помощью двойного окрашивания тромбоцитов в реакции прямой поверхностной иммунофлуоресценции и последующим детектированием методом проточной цитометрии.

Цель исследования – изучить дополнительные факторы, усугубляющие течение рефрактерности к трансфузиям донорских тромбоцитов у больных апластической анемией (AA) и гемобластозами.

Материалы и методы. С 9 ноября 2016 г. по 28 апреля 2018 г. в клиниках центра наблюдались 77 больных в возрасте 19–71 года (медиана – 36 лет), среди них мужчин – 33, женщин – 44. Распределение больных: АА – 47 (61 %); миелодиспластический синдром (МДС) – 10 (13 %); острый миелоидный лейкоз (ОМЛ) – 20 (26 %). Во всех группах больных проводили определение PAIgG / M / A, PAC3 / C4 и сравнительный анализ плотности фиксации по средней интенсивности флуоресценции (СИФ) с помощью двойного окрашивания (CD41a-PE; IgA, M, G-FITC; C3 / C4‑FITC). Характеристика PAIgG / M / A и PAC3 / C4 подробно изучалась в группе больных АА на разных этапах терапии и при развитии рефрактерности к трансфузиям донорских тромбоцитов. В качестве отрицательного контроля плотности фиксации иммуноглобулинов и компонентов системы комплемента на тромбоцитах проанализированы данные 28 здоровых доноров.

Результаты. Обнаружено, что СИФ PAIgG/M/А и PAC3/С4 была выше во всех группах больных (АА, МДС, ОМЛ) по сравнению с донорами. В группах больных АА, ОМЛ, МДС выявляется высокая плотность фиксации на поверхности тромбоцитов PAIgM и PAIgА, а также сочетание PAIgM / A, PAIgM / С3 / С4 и PAIgА / С3 / С4. Постоянная трансфузионная нагрузка сопровождается появлением PAIgА и PAС3, а при развитии аллоиммунизации и рефрактерности к трансфузиям появляются также PAIgM и PAС4. Среди больных АА на фоне постоянной трансфузионной нагрузки с развитием рефрактерности к трансфузиям донорских тромбоцитов, а также при множественных инфекционных осложнениях обнаруживается высокая плотность фиксации PAIgM, PAIgА, а при рецидиве АА наблюдалось повышение СИФ PAС3.

Заключение. В дополнение к применению определенного алгоритма трансфузионной терапии также необходимо осуществлять определение PAIgG / M / A и PAC3 / C4 для прогнозирования усиления рефрактерности к трансфузиям донорских тромбоцитов.

1. Савченко В.Г. Алгоритмы диагностики и протоколы лечения заболеваний системы крови в 2 томах. М.: Практика, 2018. С. 1006–1255.

2. Corazza M. Hranchook M. Massive blood transfusion therapy. AANA J 2000;68(4):311–4.

3. Fletcher C.H., DomBourian M.G., Millward P.A. Platelet transfusion for patients with cancer. Cancer Control 2015;22(1):47–51. DOI: 10.1177/107327481502200107.

4. Зотиков Е.А., Бабаева А.Г., Головкина Л.Л. Тромбоциты и антитромбоцитарные антитела. М.: Монолит, 2003. 125 с.

5. Рахмани А.Ф., Михайлова Е.А., Дубинкин И.В. и др. Рефрактерность к трансфузиям донорских тромбоцитов у больных апластической анемией и гемобластозами. Онкогематология 2018;13(2):62–72. DOI: 10.17650/18188346-2018-13-2-62-72.

6. Hod E., Schwartz J. Platelet transfusion refractoriness. Br J Haematol 2008;142(3):348–60. DOI: 10.1111/j.1365-2141.2008.07189.x.

7. Forest S.K., Hod E.A. Management of the platelet refractory patient. Hematol Oncol Clin North Am 2016;30(3):665–77. DOI: 10.1016/j.hoc.2016.01.008.

8. Kiefel V., Konig C., Kroll H., Santoso S. Platelet alloantibodies in transfused patients. Transfusion 2001;41(6):766–70. DOI:10.1046/j.15372995.2001.41060766.x.

9. Мазуров А.В. Физиология и патология тромбоцитов. М.: Литтерра, 2011. 456 с.

10. Wallington T. Essential immunology for transfusion medicine. In: Practical Transfusion Medicine, 3rd edn. Eds.: M.F. Murphy, D.H. Pamphilon. Blackwell Publishing Ltd, 2009. DOI: 10.1002/9781444311761.ch2.

11. Sayyadi M., Shaiega M., Zarif M. et al. Platelet transfusion outcome and flow cytometric monocyte phagocytic assay (FMPA). Arch Iran Med 2016;19(6):426– 9. DOI: 0161906/AIM.0010.

12. He Y., Zhao Y.X., Zhu M.Q. et al. Detection of autoantibodies against platelet glycoproteins in patients with immune thrombocytopenic purpura by flow cytometric immunobead array. Clin Chim Acta 2013;415:176–80. DOI: 10.1016/j.cca.2012.10.035.

13. Huh H.J., Park C.J., Kim S.W. et al. Flow cytometric detection of platelet-associated immunoglobulin in patients with immune thrombocytopenic purpura and nonimmune thrombocytopenia. Ann Clin Lab Sci 2009;39(3):283–8.

14. Romero-Guzmán L.T., López-Karpovitch X., Paredes R. et al. Detection of plateletassociated immunoglobulins by flow cytometry for the diagnosis of immune thrombocytopenia: a prospective study and critical review. Haematologica 2000;85(6):627–31.

15. Peerschke E.I., Yin W., Ghebrehiwet B. Platelet mediated complement activation. Adv Exp Med Biol 2008;632:81–91. DOI: 10.1007/978-0-387-78952-1_7.

16. Kiefel V., Freitag E., Kroll H., Santoso S. et al. Platelet autoantibodies (IgG, IgM, IgA) against glycoproteins IIb/IIIa and Ib/ IX in patients with thrombocytopenia. Ann Hematol 1996;72(4):280–5.

17. Myers T., Kim B., Steiner M., Baldini M. Platelet-associated complement C3 in immune thrombocytopenic purpura. Blood 1982;59(5):1023–8.

18. Panzer S., Szamait S., Bödeker R.H. et al. Platelet-associated immunoglobulins IgG, IgM, IgA and complement C3 in immune and nonimmune thrombocytopenic disorders. Am J Hematol 1986;23(2):89– 99. DOI: 10.1002/ajh.2830230203.

19. Andrews R.K., Gardiner E.E. Basic mechanisms of platelet receptor shedding. Platelets 2017;28(4):319–24. DOI: 10.1080/09537104.2016.1235690.

20. Bender M., Stegner D., Nieswandt B. Model systems for platelet receptor shedding. Platelets 2017;28(4):325–32. DOI: 10.1080/09537104.2016.1195491.

21. Gardiner E.E., Al-Tamimi M., Andrews R.K., Berndt M.C. Platelet receptor shedding. Methods Mol Biol 2012;788:321–39. DOI: 10.1007/978-161779-307-3_22.

22. Manis J.P., Silberstein L.E. Platelet refractoriness: It’s not the B-all and endall. Blood 2016;127(14):1740–1. DOI: 10.1182/blood-2016-02-695437.

23. Михайлова Е.А. Программное лечение больных апластической анемией. В кн.: В.Г. Савченко, Е.А. Михайлова, Е.Н. Устинова, Г.А. Клясова. Программное лечение лейкозов. М.: Практика, 2018. С. 328–342.

24. Killick S., Bown N., Cavenagh J. et al. Guidelines for the diagnosis and management of adult aplastic anaemia. Br J Haematol 2016;172(2):187–207. DOI: 10.1111/bjh.13853.

25. Bevans M.F., Shalabi R.A. Management of patients receiving antithymocyte globulin for aplastic anemia and myelodysplastic syndrome. Clin J Oncol Nurs 2004;8(4):377–82. DOI: 10.1188/04.CJON.377-382.

26. Cheson B.D., Bennett J.M., Kopecky K.J. et al. Revised recommendations of the International Working Group for diagnosis, standardization of response criteria, treatment outcomes, and reporting standards for therapeutic trials in acute myeloid leukemia. J Clin Oncol 2003;21(24):4642–9. DOI: 10.1200/JCO.2004.99.116.

27. Carubbi C., Masselli E., Gesi M. et al. Cytofluorimetric platelet analysis. Semin Thromb Hemost 2014;40(1):88–98. DOI: 10.1055/s-0033-1363472.

28. Sarkar R.S., Philip J., Jain N. Detection and identification of platelet-associated alloantibodies by a solid-phase modified antigen capture elisa (MACE) technique and its correlation to platelet refractoriness in multi platelet concentrate transfused patients. Indian J Hematol Blood Transfus 2015;31(1):77–84. DOI: 10.1007/s12288014-0374-4.