ПРИМЕНЕНИЕ ПРЯМОГО АНТИГЛОБУЛИНОВОГО ТЕСТА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ АУТОАНТИТЕЛ ПРИ АНЕМИЯХ РАЗЛИЧНОГО ГЕНЕЗА

Введение. Аутоантитела к эритроцитам являются главной причиной гемолиза у пациентов с аутоиммунными гемолитическими          анемиями (АИГА) и могут осложнять течение различных заболеваний. Для выявления аутоантител используют различные методы, но наиболее широко применяемым является прямой антиглобулиновый тест (ПАГТ) – полиили моноспецифический. В основе     метода лежит детекция иммуноглобулинов (Ig) классов G, M, A и компонентов комплемента С3, фиксированных на поверхности                эритроцита. ПАГТ применяют для дифференциальной диагностики анемий на иммунно-зависимые и иммунно-независимые.

Цель исследования – проведение анализа результатов ПАГТ у пациентов с различными заболеваниями, сопровождаемыми анемией.

Материалы и методы. Материалом для исследования являлись образцы крови пациентов от 5 до 90 лет с анемией, проходивших             обследование и/или лечение в ФГБУ «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства». Были изучены результаты лабораторного тестирования образцов крови за период               2013–2016 гг. и проанализированы полученные данные. Определение классов Ig – антител к антигенам эритроцитов – проводили в прямой реакции Кумбса (R.R. Coombs) с помощью гелевой системы DiaMed-ID (DiaMed Micro Typing System, Швейцария).   

Результаты. ПАГТ был положительным у пациентов с АИГА (53 %), пароксизмальной ночной гемоглобинурией (ПНГ) (100 %),   криоглобулинемией (62,5 %), хроническими лимфопролиферативными заболеваниями (ХЛПЗ) (27,5 %), множественными миеломами (23,6 %), анемиями неясного генеза (21,4 %) и прочими аутоиммунными заболеваниями (19 %). В образцах крови пациентов             с положительным результатом ПАГТ были выявлены как моноспецифичные IgG или компоненты комплемента С3, так и различные сочетания Ig с компонентом комплемента: IgG + C3; IgG + IgM + C3; IgM + C3 и IgG + IgА. В нашем исследовании положительный результат ПАГТ не всегда был ассоциирован с гемолизом. Среди всех пациентов с положительным ПАГТ признаки гемолиза наблюдались в 53,2 % случаев, и только у пациентов с АИГА и ПНГ они присутствовали в 100 %.   

Заключение. Положительный ПАГТ является одним из критериев для диагностики иммунных гемолитических анемий, однако              не всегда свидетельствует об аутоиммунном патогенезе анемии, наличии специфических аутоантител и, соответственно,           не всегда ассоциирован с гемолизом. Таким образом, только комплексная оценка клинической картины с результатами ПАГТ        позволит провести диагностику заболевания.

1. Rosse W.F. Autoimmune hemolytic anemia. Hosp Prac 1985;20(8):105–19. PMID: 3926784.

2. Coombs R.R., Mourant A.E., Race R.R. A new test for the detection of weak and incomplete Rh agglutinins. Br J Exp Pathol 1945;26:255–66. PMID: 21006651.

3. Janvier D., Sellami F., Missud F. et al. Severe autoimmune hemolytic anemia caused by a warm IgA autoantibody directed against the third loop of band. Transfusion 2002;42(12):1547–52. PMID: 12473132.

4. Bardill B., Mengis C., Tschopp M. et al. Severe IgA-mediated auto-immune hae-molytic anaemia in a 48-yr-old woman. Eur J Haematol 2003;70(1):60–3. PMID: 12631260.

5. Zeerleder S. Autoimmune haemolytic anaemia – a practical guide to cope with a diagnostic and therapeutic challenge. Neth J Med 2011;69(4):177–84. PMID: 21527804.

6. Packman C.H. Hemolytic anemia due to warm autoantibodies. Blood Rev 2008;22(1):17–31. DOI: 10.1016/j.blre.2007.08.001. PMID: 17904259.

7. Shimanovsky A., Alvarez A.J., Murali S. et al. Autoimmune manifestations in patients with multiple myeloma and monoclonal gammopathy of undetermined significance. BBA Clin 2016;6:12–8. DOI: 10.1016/j.bbacli.2016.05.004. PMID: 27331023.

8. D’Arena G., Guariglia R., La Rocca F. et al. Autoimmune Cytopenias in Chronic Lymphocytic Leukemia. Clin Dev Immun 2013;2013:730131. DOI: 10.1155/2013/730131:1-8. PMID: 23690826.

9. Berentsen S., Sundic T. Red Blood Cell Destruction in Autoimmune Hemolytic Anemia: Role of Complement and Potential New Targets for Therapy. Biomed Res Int 2015;2015:363278. DOI: 10.1155/2015/363278:1-11. PMID: 25705656.

10. Трикоменас Н.Н. Клинико-лабораторные особенности течения системной красной волчанки у больных с криоглобулинемией. Автореф. дис. … канд. мед. наук. Оренбург, 2011. Доступно по: http://medical-diss.com/medicina/kliniko-laboratornye-osobennosti-techeni-ya-sistemnoy-krasnoy-volchanki-u-bolnyh-s-krioglobulinemiey. [Trikomenas N.N. Clinico-laboratory features of systemic lupus erythematosus in patients with cryoglobulinemia. Аuthor’s abstract … of thesis of candidate of medicine, 2011 (In Russ.). Available at: http://medical-diss.com/medicina/kliniko-laboratornye-osobennosti-techeniya-sistemnoy-krasnoy-volchanki-u-bolnyh-s-krioglobulinemiey].

11. Хайдарова Ю.М., Курманова Г.М. Синдром криоглобулинемии при гепатите С. Вестник КазНМУ 2012;2:18897. [Khaydarova Yu.M., Kurmanova G.M. Cryoglobulinemia syndrome in hepatitis C. Vestnik KazNMU = Bulletin of KazNMU 2012;2:188–97 (In Russ.)].

12. Lin J.S., Hao T.C., Lyou J.Y. et al. Clinical application of a flow cytometric direct antiglobulin test. Transfusion 2009;49:1335–46. DOI: 10.1111/j.1537-2995.2009.02130.x. PMID: 19320864.

13. Dearden C., Wade R., Else M. et al. The prognostic significance of a positive direct antiglobulin test in chronic lymphocytic leukemia: a beneficial effect of the combination of fludarabine and cyclophosphamide on the incidence of hemolytic anemia. Blood 2008;111(4):1820–6. DOI: 10.1182/blood-2007-07-101303. PMID: 18055869.

14. Chapuy C.I., Nicholson R.T., Aguad M.D. et al. Resolving the daratumumab interference with blood compatibility testing. Transfusion 2015;55(6):1545–54. DOI: 10.1111/trf.13069. PMID: 25764134.

15. Garratty G. Effect of cell-bound proteins on the in vivo survival of circulating blood cells. Gerontology 1991;37:68–94. PMID: 2055500.

16. Chaplin H., Nasongkla M., Monroe M.C. Quantification of red blood cellbound C3d in normal subjects and random hospitalized patients. Br J Haematol 1981;48:69–78. PMID: 6972779.

17. Freedman J., Ho M., Barefoot C. Red blood cell-bound C3d in selected hospital patients. Transfusion 1982;22:515–20. PMID: 6216638.

18. Williams M., Thomas D., Harman C.P. et al. Positive direct antiglobulin tests due to clavulanic acid. Antimicrob Agents Chemother 1985;27(1):125–7. PMID: 3872623.