OncohematologyOncohematologyОнкогематология1818-83462413-4023Publishing House ABV Press97810.17650/1818-8346-2024-19-4-108-114NEW DIRECTIONS, DIAGNOSTIC OPPORTUNITIES, AND TREATMENT ADVANCESНОВЫЕ НАПРАВЛЕНИЯ, ВОЗМОЖНОСТИ ДИАГНОСТИКИ И УСПЕХИ ЛЕЧЕНИЯClinical and prognostic significance of T-regulatory cells and CD28 expression on T-lymphocytes in patients with immune thrombocytopeniaКлинико-прогностическая значимость Т-регуляторных клеток и экспрессии CD28 на Т-лимфоцитах у больных иммунной тромбоцитопениейhttps://orcid.org/0000-0002-4393-1759ChuksinaYu. Yu.ЧуксинаЮ. Ю.
Russian Federation

Yulia Yuryevna Chuksina,

61/2 Shchepkina St., Moscow 129110;

Build. 1, 1 Novogireevskaya St., Moscow 111123

Юлия Юрьевна Чуксина,

129110 Москва, ул. Щепкина, 61/2;

111123 Москва, ул. Новогиреевская, 1, корп. 1

tchuxina2009@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0003-2847-4374ZakharovS. G.ЗахаровС. Г.
Russian Federation

61/2 Shchepkina St., Moscow 129110

129110 Москва, ул. Щепкина, 61/2

https://orcid.org/0000-0001-7493-0030MitinaT. A.МитинаТ. А.
Russian Federation

61/2 Shchepkina St., Moscow 129110

129110 Москва, ул. Щепкина, 61/2

https://orcid.org/0009-0005-6618-0707KhmelevskayaA. N.ХмелевскаяА. Н.
Russian Federation

Build. 1, 1 Novogireevskaya St., Moscow 111123

111123 Москва, ул. Новогиреевская, 1, корп. 1

M.F. Vladimirskiy Moscow Regional Research Clinical InstituteГБУЗ МО «Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского»A.S. Loginov Moscow Clinical Scientific Center, Moscow Healthcare DepartmentГБУЗ г. Москвы «Московский клинический научно-практический центр им. А.С. Логинова Департамента здравоохранения г. Москвы»101220241941081141012202410122024https://oncohematology.abvpress.ru/ongm/article/view/978

Background. The leading role in the control of the immune response and peripheral tolerance is played by T-regulatory cells, as well as costimulatory molecules C28 on T-lymphocytes, which are necessary for effective activation. While T-regulatory cells in immune thrombocytopenia (IT) are actively studied in order to find an effective influence on their functions, publications on the study of costimulation processes in this disease are quite rare. Given the pronounced immunosuppressive effect of glucocorticosteroids (GCS) used in the treatment of patients with IT, it seems particularly relevant to study the role of T-regulatory cells and the expression features of costimulatory C28 molecules on T-lymphocytes to expand our understanding of the disease pathogenesis and justify new approaches to treating patients in real clinical practice.

Aim. To evaluate the clinical and prognostic significance of T-regulatory cells and C28 expression on peripheral blood T-lymphocytes in patients with newly diagnosed IT and resistant to GCS therapy.

Materials and methods. The content of T-regulatory cells and C28 expression features on peripheral blood T-lymphocytes were studied by flow cytometry in 18 patients with newly diagnosed IT and 19 patients resistant to GCS therapy. Thirty healthy individuals were examined as a control group.

Results. A significant (p ˂ 0.05) decrease in the content of classical T-regulatory cells (C4+C25+hiC127–) was revealed both in patients with newly diagnosed IT and in those resistant to GCS, while no significant differences were found in C8+C28– peripheral T-regulatory cells level in patients with IT of both groups compared to healthy individuals. In patients with IT of both groups, a significant increase in the proportion of T-helper (p < 05; p ˂ 01, respectively) and cytotoxic C8+ (p ˂ 0.05; p ˂ 0.01, respectively) T-lymphocytes expressing C28 was found compared to normal values. The level of T-helper lymphocytes (C4+C28–) was 2 times higher in the group of patients with resistance to GCS compared to newly diagnosed IT patients, and 3.5 times higher compared to healthy individuals.

Conclusion. T-regulatory cells and expression of C28 costimulatory molecules play an important role in the immunopathogenesis of IT. A significant increase in the content of the C4+C28null lymphocyte population (C4+C28–) in the peripheral blood of IT patients can be a prognostic criterion for GCS resistance, which may require a revision of the treatment strategy.

Введение. Ведущую роль в контроле иммунного ответа и периферической толерантности играют Трегуляторные клетки, а также костимулирующие молекулы C28 на Тлимфоцитах, необходимые для эффективной активации. Если Трегуляторные клетки при иммунной тромбоцитопении (ИТ) активно изучаются в целях поиска эффективного влияния на их функции, то исследования процессов костимуляции при данном заболевании достаточно редки. С учетом выраженного иммуносупрессивного действия применяемых в лечении больных ИТ глюкокортикостероидов (ГС) особенно актуально изучение роли Трегуляторных клеток и особенностей экспрессии костимулирующих молекул C28 на Тлимфоцитах для расширения представлений о патогенезе заболевания и обоснования новых подходов к лечению пациентов в реальной клинической практике.

Цель исследования – оценить клинико-прогностическую значимость Т-регуляторных клеток и экспрессии C28 на Т-лимфоцитах периферической крови у больных впервые выявленной ИТ и имеющих резистентность к терапии ГС.

Материалы и методы. Исследовано содержание Т-регуляторных клеток и особенностей экспрессии C28 на Т-лимфоцитах периферической крови методом проточной цитометрии у 18 пациентов с впервые выявленной ИТ и у 19 пациентов, имеющих резистентность к терапии ГС. В качестве контрольной группы обследованы 30 практически здоровых лиц.

Результаты. Выявлено значимое (р ˂ 0,05) снижение содержания классических Т-регуляторных клеток (C4+C25+hiC127−) как у больных впервые выявленной ИТ, так и имеющих резистентность к ГС, в то время как не получено существенных различий в уровне периферических Т-регуляторных клеток с фенотипом C8+C28– у больных ИТ обеих групп по сравнению с практически здоровыми лицами. пациентов с ИТ обеих групп обнаружено выраженное увеличение доли Т-хелперных (р ˂ 0,05; р ˂ 0,01 соответственно) и цитотоксических C8+ Т лимфоцитов (р ˂ 0,05; р ˂ 0,01 соответственно), экспрессирующих C28, по сравнению с нормальными показателями. Уровень Т-хелперных лимфоцитов (C4+C28–) был в 2 раза выше в группе пациентов с резистентностью к ГС по сравнению с пациентами с впервые выявленной ИТ, а по сравнению с практически здоровыми – в 3,5 раза.

Заключение. Трегуляторные клетки и экспрессия костимулирующих молекул C28 играют важную роль в иммунопатогенезе ИТ.

Выраженное увеличение содержания популяции C4+C28null лимфоцитов (C4+C28–) в периферической крови пациентов с ИТ может быть прогностическим критерием резистентности к терапии ГС, что может потребовать пересмотра стратегии лечения.

immune thrombocytopeniaT-regulatory cellC28 costimulatory moleculeflow cytometryиммунная тромбоцитопенияТ-регуляторная клеткакостимулирующая молекула C28проточная цитометрияClinical recommendations. Idiopathic thrombocytopenic purpura (ITP) in adults. 2021. Available at: https://cr.minzdrav.gov.ru/schema/150_2 (accessed 04.02.2024). (In Russ.).Клинические рекомендации. Идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура (ИТП) у взрослых. 2021. Доступно по: https://cr.minzdrav.gov.ru/schema/150_2 (дата обращения 04.02.2024).Kovaleva L.G., Safonova T.I. Idiopathic thrombocytopenic purpura (ITP) of adults. Primary immune thrombocytopenia (ITP) in adults. Werlhof’s disease. Available at: https://rusneb.ru/catalog/000200_000018_RU_NLR_BIBL_A_010699665/ (accessed 04.02.2024). (In Russ.).Ковалева Л.Г., Сафонова Т.И. Идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура (ИТП) взрослых. Первичная иммунная тромбоцитопения (ИТП) взрослых. Болезнь Верльгофа. Доступно по: https://rusneb.ru/catalog/000200_000018_RU_NLR_BIBL_A_010699665/ (дата обращения 04.02.2024).Provan D., Arnold D.M., Bussel J.B. et al. Updated international consensus report on the investigation and management of primary immune thrombocytopenia. Blood Adv 2019;3(22):3780–817. DOI: 10.1182/bloodadvances2019000812Rodeghiero F., Stasi R., Gernsheimer T. et al. Standardization of terminology, definitions and outcome criteria in immune thrombocytopenic purpura of adults and children: report from international working group. Blood 2009;113(11):2386–93. DOI: 10.1182/blood200807162503Michel M. Immune thrombocytopenia nomenclature, consensus reports, and guidelines: what are the consequences for daily practice and clinical research? Semin Hematol 2013;50(Suppl 1):550–4. DOI: 10.1053/J.Seminhematol.2013.03.008Grozovsky R., Begonja A.J., Liu K. et al. The Ashwell–Morell receptor regulates hepatic thrombopoietin production via JAK2STAT3 signaling. Nat Med 2015;21(1):47–54. DOI: 10.1038/nm.3770Zhao C., Li X., Zhang F. et al. Increased cytotoxic Tlymphocyte mediated cytotoxicity predominant in patients with idiopathic thrombocytopenic purpura without platelet autoantibodies. Haematologica 2008;93(9):1428–30. DOI: 10.3324/haematol.12889Cines D.B., Cuker A., Semple J.W. Pathogenesis of immune thrombocytopenia. Presse Med 2014;43(4 Pt 2):e49–59. DOI: 10.1016/j.lpm.2014.01.010Sakaguchi S., Sakaguchi N., Shimizu J. et al. Immunologic tolerance maintained by CD25+CD4+ regulatory T cells: their common role in controlling autoimmunity, tumor immunity, and transplantation tolerance. Immunol Rev 2001;182:18–32. DOI: 10.1034/j.1600065x.2001.1820102.xSakaguchi S., Yamaguchi T., Nomura T., Ono M. Regulatory T cells and immune tolerance. Cell 2008;133(5):775–87. DOI: 10.1016/j.cell.2008.05.009Freydlin I.S. Tegulatory Tcells: origin and function. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology 2005;7(4):347–54. (In Russ.). DOI: 10.1016/j.cell.2008.05.009Фрейдлин И.С. Регуляторные Тклетки: происхождение и функции. Медицинская иммунология 2005;7(4):347–54. DOI: 10.15789/1563062520054347354 Freydlin I.S. Tegulatory Tcells: origin and function. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology 2005;7(4):347–54. (In Russ.). DOI: 10.1016/j.cell.2008.05.009Zheng S.G., Wang J., Wang P. et al. IL2 is essential for TGFbeta to convert naive CD4+CD25− cells to CD25+Foxp3+ regulatory T cells and for expansion of these cells. J Immunol 2007;178(4):2018–27. DOI: 10.4049/jimmunol.178.4.2018Shevyrev D., Tereshchenko V. Treg heterogeneity, function, and homeostasis. Front Immunol 2020;10:3100. DOI: 10.3389/fimmu.2019.03100Kadagidze Z.G., Chertkova A.I. Immunity and cancer. Prakticheskaya onokologiya = Practical Oncology 2016;17(2):62–73. (In Russ.).Кадагидзе З.Г., Черткова А.И. Иммунная система и рак. Практическая онокология 2016;17(2):62–73.Huff W.X., Kwon J.H., Henriquez M. et al. The evolving role of CD8+CD28− immunosenescent T cells in cancer immunology. Int J Mol Sci 2019;20(11):2810. DOI: 10.3390/ijms20112810Hui E., Cheung J., Zhu J. et al. T cell costimulatory receptor CD28 is a primary target for PD1 mediated inhibition. Science 2017;355(6332):1428–33. DOI: 10.1126/science.aaf1292BrunnerWeinzierl M.C., Hoff H., Burmester G.R. Multiple function for CD28 and cytotoxic Tlymphocyte antigen4 during different phases of Tcell responses: implications for arthritis and autoimmune diseases. Arthritis Res Ther 2004;6(2):45–54. DOI: 10.1186/ar1158Zakharov S.G., Mitina T.A., Zakharova A.V. et al. Glucocorticosteroidinduced complications in patients with idiopathic thrombocytopenic purpura. Onkogematologiya = Oncohematology 2023;18(4):233–43. (In Russ.). DOI: 10.17650/1818¬8346¬2023¬18¬4¬233¬243Захаров С.Г., Митина Т.А., Захарова А.В. и др. Осложнения терапии глюкокортикостероидами у пациентов с идиопатической тромбоцитопенической пурпурой. Онкогематология 2023;18(4):233–43. DOI: 10.17650/1818¬8346¬2023¬18¬4¬233¬243Melikyan A.L., Pustovaya E.I., Kalinina M.V. et al. Epidemiological characteristics of primary immune thrombocytopenia in adult population of the Russian Federation. Klinicheskaya onkogematologiya = Clinical Oncohematology 2017;4(10):558–9. (In Russ.).Меликян А.Л., Пустовая Е.И., Калинина М.В. и др. Эпидемиологические характеристики первичной иммунной тромбоцитопении у взрослого населения в Российской Федерации. Клиническая онкогематология 2017;4(10): 558–9.Melikyan A.L., Pustovaya E.I., Egorova E.K. et al. Differential diagnosis of thrombocytopenes. Onkogematologiya = Oncohematology 2017;12(1):78–87. (In Russ.). DOI: 10.17650/1818834620171217887Меликян А.Л., Пустовая Е.И., Егорова Е.К. и др. Дифференциальная диагностика тромбоцитопений. Онкогематология 2017;12(1):78–87. DOI: 10.17650/1818834620171217887Zufferey A., Kapur R., Semple J.W. Pathogenesis and therapeutic mechanisms in immune thrombocytopenia (ITP). J Clin Med 2017;6(2):16. DOI: 10.3390/jcm6020016Li L., Zhao Y., Tong X. et al. The predictive value of regulatory T cells on glucocorticoid sensitivity in patients with immune thrombocytopenia: a multicentre, prospective clinical study. Br J Haematol 2021;193(3):619–27. DOI: 10.1111/bjh.17368Yarilin A.A. Adaptive immunity. In: Immunology. Moscow: GEOTARMedia, 2010. Pp. 231–512. (In Russ.).Ярилин А.А. Адаптивный иммунитет. В кн.: Иммунология. М.: ГЭОТАРМедиа, 2010. С. 231–512.Thewissen M., Somers V., Hellings N. et al. CD4+CD28null T cells in autoimmune disease: pathogenic features and decreased susceptibility to immunoregulation. J Immunol 2007;179(10): 6514–23. DOI: 10.4049/jimmunol.179.10.6514Bano A., Pera A., Almoukayed A. et al. CD28nullCD4 Tcell expansions in autoimmune disease suggest a link with cytomegalovirus infection. F1000Res 2019;8:F1000 Faculty Rev327. DOI: 10.12688/f1000research.17119.1Pera A., Caserta S., Albanese F. et al. CD28null proatherogenic CD4 Tcells explain the link between CMV infection and an increased risk of cardiovascular death. Theranostics 2018;8(16):4509–19. DOI: 10.7150/thno.27428Shabir S., Smith H., Kaul B. et al. Cytomegalovirusassociated CD4+CD28null cells in NKG2Ddependent glomerular endothelial injury and kidney allograft dysfunction. Am J Transplant 2016;16(4):1113–28. DOI: 10.1111/ajt.13614EscarraSenmarti M., BuenoTopete M.R., JaveSuarez L.F. et al. Loss of CD28 within CD4+ T cell subsets from cervical cancer patients is accompanied by the acquisition of intracellular perforin, and is further enhanced by NKG2D expression. Immunol Lett 2017;182:30–8. DOI: 10.1016/j.imlet.2017.01.006Guan Y., Cao M., Wu X. et al. CD28null T cells in aging and diseases: from biology to assessment and intervention. Int Immunopharmacol 2024;131:111807. DOI: 10.1016/j.intimp.2024.111807