OncohematologyOncohematologyОнкогематология1818-83462413-4023Publishing House ABV Press54010.17650/1818-8346-2022-17-2-75-81BASIC RESEARCHФУНДАМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ В ПРАКТИЧЕСКОЙ МЕДИЦИНЕ НА СОВРЕМЕННОМ ЭТАПЕAssociation of pSTAT3, pSyk with c-Myc, p53, BCL2 proteins expression and survival of patients with diffuse large B-cell lymphomaАссоциация рSTAT3, pSyk с экспрессией белков c-Myc, р53, BCL2 и выживаемостью больных диффузной В-крупноклеточной лимфомойhttps://orcid.org/0000-0003-2054-2870RosinV. A.РосинВ. А.
Russian Federation

6100027, Kirov, Krasnoarmeyskaya St., 72

 6100027 Киров, Красноармейская ул., 72

VaneevaE. V.ВанееваЕ. В.
Russian Federation

6100027, Kirov, Krasnoarmeyskaya St., 72

6100027 Киров, Красноармейская ул., 72

vaneeva.elena.vic@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8688-1344DyakonovD. A.ДьяконовД. А.
Russian Federation

6100027, Kirov, Krasnoarmeyskaya St., 72

6100027 Киров, Красноармейская ул., 72

https://orcid.org/0000-0001-8639-719XSamarinaS. V.СамаринаС. В.
Russian Federation

6100027, Kirov, Krasnoarmeyskaya St., 72

6100027 Киров, Красноармейская ул., 72

ParamonovI. V.ПарамоновИ. В.
Russian Federation

6100027, Kirov, Krasnoarmeyskaya St., 72

6100027 Киров, Красноармейская ул., 72

Kirov Research Institute of Hematology and Blood Transfusion of the Federal Medical and Biological AgencyФГБУН «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства»1404202217275811304202213042022https://oncohematology.abvpress.ru/ongm/article/view/540

Background. Diffuse large B cell lymphoma (DLBCL) is one of the most common non-Hodgkin’s lymphomas. The effectiveness of R-CHOP (rituximab, cyclophosphamide, hydroxydaunorubicin, oncovin, prednisone) therapy was observed in about 60 % of patients, in 20–30 % of cases DLBCL is characterized by a refractory course. Standard clinical prognostic criteria do not accurately determine the prognosis of the disease. In this regard, the problem of developing additional predictors of DLBCL course remains relevant today and is directly related to the molecular pathogenesis of the disease.The objective: to determine the relationship of pSTAT3, pSyk with c-Myc, p53, BCL2 oncoproteins expression and survival of DLBCL patients.Materials and methods. Biopsy specimens of lymph nodes and other organs and tissues obtained from 100 patients with newly diagnosed DLBCL were used for the study. All patients received standard first-line immunochemotherapy according to the R-CHOP regimen. Determination of the relative amount of tumor cells expressing pSTAT3, pSyk was carried out using immunohistochemical and morphometric methods. The threshold value of proteins expression was calculated using the ROC analysis: for pSTAT3 it was 68 % of positive tumor cells, for pSyk – 28 %. The relationship of pSTAT3, pSyk with c-Myc, p53, BCL2 expression was determined using the Pearson χ2  test. Overall (OS) and progression-free (PFS) survival were calculated using the Kaplan–Meier method (log-rank test).Results. The suprathreshold pSTAT3 expression was found to be associated with a high content of c-Myc and p53 transcription factors in tumor cells (p = 0.015 and p = 0.010, respectively). In the group of patients with isolated overexpression of pSTAT3, the 5-year OS and PFS were lower, and the risk of death and disease progression was almost 1.5 times higher than in patients with low protein expression (p = 0.015 and p = 0.011, respectively). When studying the co-expression of pSTAT3 and pSyk, the lowest OS and PFS were recorded in the subjects with a simultaneous high expression of these proteins. With this combination of markers, the probability of an adverse event in patients when calculating OS increased by 2.9 times (p = 0.003; hazard ratio 2.9; 95 % confidence interval 1.43–5.85), and when analyzing PFS – by 2.3 times (p = 0.021; hazard ratio 2.3; 95 % confidence interval 1.14–4.87) compared with other variants of their simultaneous expression.Conclusion. Overexpression of pSTAT3 is associated with unfavorable biological tumor characteristics and poor patient survival. The combined suprathreshold expression of the pSTAT3 and pSyk proteins is associated with lower OS and PFS values compared to their isolated expression.

Введение. Диффузная В-крупноклеточная лимфома (ДВККЛ) – одна из самых частых неходжкинских лимфом. Эффективность терапии R-CHOP (ритуксимаб, циклофосфамид, гидроксидаунорубицин, онковин, преднизолон) отмечена примерно у 60 % пациентов, в 20–30 % случаев ДВККЛ характеризуется резистентным/рефрактерным течением. Клинические прогностические критерии не позволяют точно определить прогноз заболевания. В связи с этим на сегодняшний день проблема разработки дополнительных предикторов течения ДВККЛ остается актуальной и непосредственно связана с патогенезом заболевания.Цель исследования – определить связь рSTAT3, pSyk с экспрессией белков c-Myc, р53, BCL2 и выживаемостью больных ДВККЛ.Материалы и методы. Для исследования использовали биоптаты лимфатических узлов и других органов и тканей, полученные от 100 пациентов с впервые установленным диагнозом ДВККЛ. Все больные получали стандартную иммунохимиотерапию по схеме R-CHOP. Определение относительного количества экспрессирующих рSTAT3, pSyk опухолевых клеток проводили с помощью иммуногистохимического и морфометрического методов. Пороговое значение экспрессии белков вычисляли с применением ROC-анализа: для рSTAT3 оно составило 68 % положительных опухолевых клеток, для рSyk – 28 %. Взаимосвязь рSTAT3, pSyk с экспрессией с-Myc, p53, BCL2 определяли с помощью χ2 -критерия Пирсона. Общую (ОВ) и беспрогрессивную (БПВ) выживаемость рассчитывали по методу Каплана– Майера (log-rank-тест).Результаты. Установлена ассоциация гиперэкспрессии рSTAT3 с высоким содержанием в опухолевых клетках транскрипционных факторов с-Myc и р53 (р = 0,015 и р = 0,010 соответственно). В группе обследованных с высокой экспрессией pSTAT3 показатели 5-летней ОВ и БПВ были ниже, а риск возникновения летального исхода и прогрессирования заболевания почти в 1,5 раза выше, чем у больных с низкой экспрессией белка (р = 0,015 и р = 0,011 соответственно). При анализе коэкспрессии рSTAT3 и рSyk низкая ОВ и БПВ зарегистрирована у пациентов с одновременно высокой экспрессией указанных белков. При таком сочетании маркеров вероятность наступления неблагоприятного события у больных при расчете ОВ увеличивалась в 2,9 раза (р = 0,003; отношение рисков 2,9; 95 % доверительный интервал 1,43–5,85), при анализе БПВ – в 2,3 раза (р = 0,021; отношение рисков 2,3; 95 % доверительный интервал 1,14–4,87) по сравнению с другими вариантами их совместной экспрессии.Заключение. Гиперэкспрессия pSTAТ3 ассоциируется с неблагоприятными биологическими характеристиками ДВККЛ и низкой выживаемостью пациентов. Сочетанная надпороговая экспрессия рSTAT3 и рSyk связана с более низкими показателями ОВ и БПВ по сравнению с их изолированной экспрессией.

diffuse large B-cell lymphomapSTAT3 expressionpSyk expressionsurvivalдиффузная В-крупноклеточная лимфомаэкспрессия рSTAT3экспрессия pSykвыживаемостьThe study was performed with the support of Kirov Research Institute of Hematology and Blood Transfusion of the Federal Medical and Biological Agence.Исследование проведено при поддержке ФГБУН «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства».Bahar T., Chowdhury Z.Z., Rahman Sh. et al. Clinicopathological correlation with outcome of diffuse large B cell lymphoma: experience in a specialized cancer care centre in Bangladesh. J Medicine 2021;22(1):3–6. DOI:10.3329/jom.v22i1.51383.Vaneeva E.V., Rosin V.A., Dyakonov D.A. et al. Assessment of the prognostic value of pSTAT3 expression in diffuse large B-cell lymphoma in a Russian sample of patients. Sibirskiy nauchnyy meditsinskiy zhurnal = Siberian Scientific Medical Journal 2019;39(5):125–33. (In Russ.). DOI:10.15372/SMMJ20190515.Ванеева Е.В., Росин В.А., Дьяконов Д.А. и др. Оценка прогностического значения экспрессии pSTAT3 при диффузной В-крупноклеточной лимфоме на российской выборке пациентов. Сибирский научный медицинский журнал 2019;39(5):125–33. DOI:10.15372/SMMJ20190515.Mondello P., Mian M. Frontline treatment of diffuse large B-cell lymphoma: Beyond R-CHOP. Hematol Oncol 2019;37(4):333–44. DOI:10.1002/hon.2613.Swerdlow S.H., Campo E., Harris N.L. et al. WHO classification of tumours of haematopoietic and lymphoid tissues. 4th edn. Lyon, France: IARC, 2017.Roschewski M., Staudt L.M., Wilson W.H. et al. Diffuse large B-cell lymphoma treatment approaches in the molecular era. Nat Rev Clin Oncol 2014;11(1):12–23. DOI:10.1038/nrclinonc.2013.197.Misyurina A.E., Kravchenko S.K., Obukhova T.N. et al. Expression of MYC and BCL2 proteins in patients with diffuse large B-cell lymphoma. Klinicheskaya onkogematologiya = Clinical Oncohematology 2015;1(8):44–53. (In Russ.).Мисюрина А.Е., Кравченко С.К., Обухова Т.Н. и др. Экспрессия белков MYC и BCL2 у больных диффузной В-крупноклеточной лимфомой. Клиническая онкогематология 2015;1(8):44–53.Rastorguev S.M., Koroleva D.A., Boulygina E.S. et al. Clinical and prognostic value of molecular markers of diffuse large B-cell lymphoma. Klinicheskaya onkogematologiya = Clinical Oncohematology 2019:12(1): 95–100. (In Russ.). DOI:10.21320/2500-2139-201912-1-95-100.Расторгуев С.М., Королева Д.А., Булыгина Е.С. и др. Клиническое и прогностическое значение молекулярных маркеров диффузной В-крупноклеточной лимфомы. Клиническая онкогематология 2019;12(1):95–100. DOI:10.21320/2500-2139-201912-1-95-100.Miao Y., Medeiros L., Xu-Monette Z.Y. et al. Dysregulation of cell survival in diffuse large B cell lymphoma: mechanisms and therapeutic targets. Front Oncol 2019;9:1–17. DOI:10.3389/fonc.2019.00107.Brachet-Botineau M., Polomski M., Neubauer A. et al. Pharmacological inhibition of oncogenic STAT3 and STAT5 signaling in hematopoietic cancers. Cancers 2020;12:240. DOI:10.3390/cancers12010240.Seda V., Mraz M. Eur B-cell receptor signalling and its crosstalk with other pathways in normal and malignant cells. J Haematol 2014;94(3):193–205. DOI:10.1111/ejh.12427.Nikitin E.A. B-cell receptor signaling pathway: mechanisms and inhibitors. Klinicheskaya onkogematologiya = Clinical Oncohematology 2014;7(3): 251–63. (In Russ.).Никитин E.A. Передача сигнала через B-клеточный рецептор: механизмы и ингибиторы. Клиническая онкогематология 2014;7(3):251–63.Wossning T., Herzog S., Köhler F. et al. Deregulated Syk inhibits di_erentiation and induces growth factor-independent proliferation of pre-B cells. J Exp Med 2006;203:2829–40. DOI:10.1084/jem.20060967.Liu H., Zhu L., Sun C. et al. Clinical significance and prognostic value of STAT3 expression in patients with diffuse large B-cell lymphoma treated with rituximab-CHOP therapy. Int J Clin Exp Med 2016;9(6):9356–64.Kovrigina A.M., Baykov V.V. Pathological differential diagnosis of primary myelofibrosis. Study guide. Moscow, Saint-Petersburg: Novartis Pharma, 2014. 11 р. (In Russ.).Ковригина А.М., Байков В.В. Патоморфологическая дифференциальная диагностика первичного миелофиброза. Учебное пособие. М., СПб.: Новартис Фарма, 2014. 11 c.Kolosenko I., Yu Y., Busker S. et al. Identification of novel small molecules that inhibit STAT3-dependent transcription and function. PLoS One 2017;12(6): e0178844. DOI:10.1371/journal.pone.Fei Y., Yu J., Li Y. et al. Plasma soluble PD-L1 and STAT3 predict the prognosis in diffuse large B cell lymphoma patients. J Cancer 2020;11(23):7001–8. DOI:10.7150/jca.47816.Ok C.J., Xu-Monette Z.Y., Tzankov A. et al. STAT3 expression and clinical inplications in de novo diffuse large B cell lymphoma: a report from the International DLBCL RituximabCHOP consortium program. Blood 2013;122:365. DOI:10.1182/blood.V122.21.365.365.