OncohematologyOncohematologyОнкогематология1818-83462413-4023Publishing House ABV Press53510.17650/1818-8346-2022-17-2-30-35RARE AND COMPLEX CLINICAL SITUATIONS: DIAGNOSTIC DIFFICULTIE AND TREATMENT CHOICEРЕДКИЕ И СЛОЖНЫЕ КЛИНИЧЕСКИЕ СИТУАЦИИ: ТРУДНОСТИ ДИАГНОСТИКИ И ВЫБОР ТАКТИКИ ЛЕЧЕНИЯA case of CALR mutation in JAK2-negative patient with polycythemiaСлучай выявления мутации в гене CALR у пациента с диагнозом истинной полицитемии и JAK2-негативным статусомhttps://orcid.org/0000-0001-7790-5033SubbotinaT. N.СубботинаТ. Н.
Russian Federation

660041, Krasnoyarsk, Svobodnyy Prospekt, 79660037, Krasnoyarsk, Kolomenskaya St., 26

660041 Красноярск, проспект Свободный, 79660037 Красноярск, ул. Коломенская, 26

stn.25@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0003-1323-2612MaslyukovaI. E.МаслюковаИ. Е.
Russian Federation

660041, Krasnoyarsk, Svobodnyy Prospekt, 79

660041 Красноярск, проспект Свободный, 79

https://orcid.org/0000-0003-1063-7702KurochkinD. V.КурочкинД. В.
Russian Federation

660041, Krasnoyarsk, Svobodnyy Prospekt, 79

660041 Красноярск, проспект Свободный, 79

https://orcid.org/0000-0003-3769-3405MikhalevM. A.МихалёвМ. А.
Russian Federation

660022, Krasnoyarsk, Partizana Zheleznyaka St., 3A

660022 Красноярск, ул. Партизана Железняка, 3А

https://orcid.org/0000-0002-4942-4299OsadchayaM. G.ОсадчаяМ. Г.
Russian Federation

660003, Krasnoyarsk, 4 Akademika Pavlova St., Build. 7

660003 Красноярск, ул. Академика Павлова, 4, стр. 7

https://orcid.org/0000-0002-9196-7246KhorzhevskiyV. A.ХоржевскийВ. А.
Russian Federation

660022, Krasnoyarsk, Partizana Zheleznyaka St., 3D

660022 Красноярск, ул. Партизана Железняка, 3Д

https://orcid.org/0000-0002-3343-6973GarkushaT. A.ГаркушаТ. А.
Russian Federation

660022, Krasnoyarsk, Partizana Zheleznyaka St., 3D

660022 Красноярск, ул. Партизана Железняка, 3Д

https://orcid.org/0000-0002-4477-8506DunaevaE. A.ДунаеваЕ. А.
Russian Federation

111123, Moscow, Novogireevskaya St., 3A

111123 Москва, ул. Новогиреевская, 3А 

https://orcid.org/0000-0001-8207-9215MironovK. O.МироновК. О.
Russian Federation

111123, Moscow, Novogireevskaya St., 3A

111123 Москва, ул. Новогиреевская, 3А 

Siberian Federal UniversityФГАОУ ВО «Сибирский федеральный университет»Federal Siberian Research and Clinical Center of the Federal Medical and Biological AgencyФГБУ «Федеральный Сибирский научно-клинический центр Федерального медико-биологического агентства»Regional Clinical HospitaКГБУЗ «Краевая клиническая больница»Krasnoyarsk Interdistrict Polyclinic No. 1КГБУЗ «Красноярская межрайонная поликлиника №1»Krasnoyarsk State Regional Bureau of PathologyКГБУЗ «Красноярское краевое патолого-анатомическое бюро»Central Research Institute of Epidemiology of the Federal Service on Customers’ Rights Protection and Human Well-being SurveillanceФБУН «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека1404202217230351104202211042022https://oncohematology.abvpress.ru/ongm/article/view/535

JAK2 mutations can be associated with any phenotypic form of chronic myeloproliferative neoplasia, while MPL and CALR mutations occur, as a rule, in cases of essential thrombocythemia and primary myelofibrosis and they are not observed in polycythemia vera. In this article we describe a clinical case of CALR mutation (c.1154_1155insGTGTC; p.E386fs*46) presence in a JAK2-negative polycythemia vera patient at age 36. In January 2018 changes in his hemogramm were recorded for the first time. In June 2018, based on a diagnostic study of bone marrow trepanobiopsy, a diagnosis of polycythemia vera was made. Molecular genetic study of the patient’s DNA didn’t reveal mutations in the JAK2 (12 and 14 exons) and the MPL genes. CALR mutation was revealed during the screening by heteroduplex analysis with the electrophoresis in polyacrylamide gel. Then the mutation was identified by Sanger’s DNA sequencing as с.1154_1155insGTGTC; p.E386fs*46. The allelic burden level as determined by pyrosequencing was 20 % (June 2018). In conclusion we can suppose that the revealed CALR mutation с.1154_1155insGTGTC; p.E386fs*46 plays its role in our patient’s polycythemia phenotype.

Мутации JAK2 могут быть связаны с любой фенотипической формой хронических миелопролиферативных неоплазий, тогда как мутации MPL и CALR возникают, как правило, в случаях эссенциальной тромбоцитемии и первичного миелофиброза и не наблюдаются при истинной полицитемии. Представлен клинический случай наличия соматической мутации CALR (c.1154_1155insGTGTC; p.E386fs*46) у пациента в возрасте 36 лет с JAK2‑отрицательным статусом с диагнозом истинной полицитемии. В январе 2018 г. впервые зафиксированы изменения в гемограмме пациента, в июне 2018 г. на основании диагностического исследования трепанобиоптата костного мозга был поставлен диагноз истинной полицитемии. При молекулярно-генетическом исследовании ДНК пациента не выявлено мутаций в экзонах 12 и 14 гена JAK2 и в гене MPL. Мутация в гене CALR обнаружена при скрининге методом гетеродуплексного анализа с последующим электрофорезом в полиакриламидном геле, затем подтверждена и идентифицирована методом Сэнгера как с.1154_1155insGTGTC; p.E386fs*46. Уровень аллельной нагрузки, определенный методом пиросеквенирования, в образце от июня 2018 г. составил 20 %. Можно предположить, что выявленная мутация CALR с.1154_1155insGTGTC; p.E386fs*46 имеет значение в развитии фенотипа полицитемии у данного пациента.

myeloproliferative neoplasmpolycythemia verasomatic mutationsJAK2-negative statusCALRмиелопролиферативная неоплазияистинная полицитемиясоматическая мутацияJAK2-отрицательный статусCALRTefferi A., Thiele J., Vannucchi A.M., Barbui T. An overview on CALR and CSF3R mutations and a proposal for revision of WHO diagnostic criteria for myeloproliferative neoplasms. Leukemia 2014;28(7):1407–13. DOI:10.1038/leu.2014.35.Luo W., Yu Z. Calreticulin (CALR) mutation in myeloproliferative neoplasms (MPNs). Stem Cell Invest 2015;2:16. DOI:10.3978/j.issn.2306-9759.2015.08.01.Klampfl T., Gisslinger H., Harutyunyan A.S. et al. Somatic mutations of calreticulin in myeloproliferative neoplasms. N Engl J Med 2013;369(25):2379–90. DOI:10.1056/NEJMoa1311347.Nangalia J., Massie C.E., Baxter E.J. et al. Somatic CALR mutations in myeloproliferative neoplasms with nonmutated JAK2. N Engl J Med 2013;369(25):2391–405. DOI:10.1056/NEJMoa1312542.Broseus J., Park J.H., Carillo S. et al. Presence of calreticulin mutations in JAK2-negative polycythemia vera. Blood 2014;124(26):3964–6. DOI:10.1182/blood-2014-06-583161.Chauveau A., Nibourel O., Tondeur S. et al. Absence of CALR mutations in JAK2-negative polycythemia. Haematologica 2017;102(1):e15–6. DOI:10.3324/haematol.2016.154799.Spivak J.L. Myeloproliferative neoplasms. N Engl J Med 2017;376(22):2168–81. DOI:10.1056/NEJMra1406186.Arber D.A, Orazi A., Hasserjian R. et al. The 2016 revision to the World Health Organization classification of myeloid neoplasms and acute leukemia. Blood 2016;127(20):2391–405. DOI:10.1182/blood-2016-03-643544.Subbotina T.N., Kharsekina A.E., Dunaeva E.A. et al. Heteroduplex analysis and pyrosequencing in the diagnostic algorithm of polycythemia vera associated with JAK2 exon 12 mutations. Laboratornaya sluzhba = Laboratory Service 2017;6(1):29–33. (In Russ.). DOI:10.17116/labs20176129-33.Субботина Т.Н., Харсекина А.Е., Дунаева Е.А. и др. Использование гетеродуплексного анализа и пиросеквенирования в алгоритме диагностики истинной полицитемии, ассоциированной с соматическими мутациями в 12 экзоне гена JAK2. Лабораторная служба 2017;6(1):29–33. DOI:10.17116/labs20176129-33.Catalog of somatic mutations in cancer. Available at: http://cancer.sanger.ac.uk/cosmic/.Li N., Yao Q.M., Gale R.P. et al. Frequency and allele burden of CALR mutations in Chinese with essential thrombocythemia and primary myelofibrosis without JAK2(V617F) or MPL mutations. Leuk Res 2015;39(5):510–4. DOI:10.1016/j.leukres.2015.02.006.Panovska-Stavridis I., Eftimov A., Ivanovski M. et al. Diversities of calreticulin gene mutations in macedonian patients with essential thrombocythemia. Clin Lymphoma Myeloma Leuk 2016;16(8):477–81. DOI:10.1016/j.clml.2016.04.019.Tefferi A., Lasho T.L., Finke C.M. et al. CALR vs JAK2 vs MPL-mutated or triplenegative myelofibrosis: clinical, cytogenetic and molecular comparisons. Leukemia 2014;28(7):1472–7. DOI:10.1038/leu.2014.3.Xu N., Ding L., Yin C. et al. A report on the co-occurrence of JAK2V617F and CALR mutations in myeloproliferative neoplasm patients. Ann Hematol 2015;94(5):865–7. DOI:10.1007/s00277-014-2248-0.Thompson E.R., Nguyen T., Kankanige Y. et al. Clonal independence of JAK2 and CALR or MPL mutations in comutated myeloproliferative neoplasms demonstrated by single cell DNA sequencing. Haematologica 2021;106(1):313–5. DOI:10.3324/haematol.2020.260448.