OncohematologyOncohematologyОнкогематология1818-83462413-4023Publishing House ABV Press27810.17650/1818-8346-2018-13-1-73-82DIAGNOSIS OF HEMATOLOGIC MALIGNANCIESДИАГНОСТИКА ГЕМОБЛАСТОЗОВRUSSIAN-BELARUSIAN MULTICENTER GROUP STANDARD GUIDELINES FOR CHILDHOOD ACUTE LYMPHOBLASTIC LEUKEMIA FLOW CYTOMETRIC DIAGNOSTICSСТАНДАРТ РОССИЙСКО-БЕЛОРУССКОЙ КООПЕРАТИВНОЙ ГРУППЫ ПО ИММУНОФЕНОТИПИРОВАНИЮ ОСТРОГО ЛИМФОБЛАСТНОГО ЛЕЙКОЗА У ДЕТЕЙhttps://orcid.org/0000-0001-6689-5861NovikovaI. A.НовиковаИ. А.
Russian Federation

1 Samory Mashela St., GSP-7, 117198 Moscow

117198 Москва, ГСП-7, ул. Саморы Машела, 1

https://orcid.org/0000-0001-9329-1828VerzhbitskayaT. Yu.ВержбицкаяТ. Ю.
Russian Federation

32 Serafimy Deryabinoy St., 620149 Yekaterinburg, 22a Karla Marksa St., 620026 Yekaterinburg

620149 Екатеринбург, ул. Серафимы Дерябиной, 32, 620026 Екатеринбург, ул. Карла Маркса, 22а

https://orcid.org/0000-0002-0441-0109MovchanL. V.МовчанЛ. В.
Belarus

43 Frunzenskaya St., Borovlyani, 223053 Minsk region

223053 Минский р-н, Боровлянский сельсовет, дер. Боровляны, ул. Фрунзенская, 43

https://orcid.org/0000-0002-9881-6221TsaurG. A.ЦаурГ. А.
Russian Federation

32 Serafimy Deryabinoy St., 620149 Yekaterinburg, 22a Karla Marksa St., 620026 Yekaterinburg

620149 Екатеринбург, ул. Серафимы Дерябиной, 32, 620026 Екатеринбург, ул. Карла Маркса, 22а

https://orcid.org/0000-0001-9533-4705BelevtsevМ. V.БелевцевМ. В.
Belarus

43 Frunzenskaya St., Borovlyani, 223053 Minsk region

223053 Минский р-н, Боровлянский сельсовет, дер. Боровляны, ул. Фрунзенская, 43

https://orcid.org/0000-0002-0889-6986PopovA. M.ПоповА. М.
Russian Federation

1 Samory Mashela St., GSP-7, 117198 Moscow

Попов Александр Михайлович

117198 Москва, ГСП-7, ул. Саморы Машела, 1

uralcytometry@gmail.coD. Rogachev National Medical Research Center of Pediatric Hematology, Oncology and ImmunologyФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева» Минздрава РоссииPediatric Oncology/Hematology Center, Regional Children Hospital № 1ГБУЗ СО «Областная детская клиническая больница № 1»Research Institute of Medical Cell TechnologiesГАУЗ СО «Институт медицинских клеточных технологий»Belarussian Research Center for Pediatric Oncology, Hematology and ImmunologyГУ «Республиканский научно-практический центр детской онкологии, гематологии и иммунологии»1105201813173821105201811052018https://oncohematology.abvpress.ru/ongm/article/view/278

Background. Flow cytometry is one of the key technologies for acute lymphoblastic leukemia (ALL) diagnostics. Nevertheless lack of technological standards hampers implementation of immunophenotyping data in treatment protocols.

Objective: development of harmonized guidelines for flow cytometric diagnostics of childhood ALL.

 Materials and methods. Three reference laboratories of the immunophenotyping group “Moscow–Berlin” took part in the development and standardization of approaches to the cytometric determination of the minimal residual disease. The sequence of steps for staining with monoclonal antibodies, selection of reagents for immunophenotyping, flow cytometer adjustment algorithms were discussed.

Results. We developed and implemented in multicenter setting the harmonized approach for immunophenotyping flow cytometric childhood ALL. Successful integration of this protocol in the multicenter group has shown good level of our approach reproducibility.

 Conclusion. These results will allow implementing diagnostic standards in stratification system of pediatric ALL treatment protocols of russianbelarusian multicenter group.

Введение. На сегодняшний день данные иммунофенотипирования используются для стратификации пациентов в рамках крупных многоцентровых исследований по терапии острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ). Необходимым условием эффективной диагностики методом проточной цитометрии является разработка единого подхода к подбору комбинаций антител, методике пробоподготовки, настройкам проточного цитометра и анализу данных. Наличие в Российской Федерации и Республике Беларусь оригинальных протоколов терапии ОЛЛ у детей диктует необходимость разработки единых алгоритмов цитометрической диагностики.

Цель исследования – разработка единого подхода для многоцентровой иммунофенотипической диагностики ОЛЛ у детей.

Материалы и методы. В разработке и стандартизации подходов к цитометрическому определению минимальной остаточной болезни приняли участие 3 референсные лаборатории иммунофенотипирования группы  «Москва–Берлин». Обсуждались последовательность этапов при окрашивании моноклональными антителами, выбор реагентов для иммунофенотипирования, алгоритмы настройки проточных цитометров.

Результаты. Был разработан и успешно внедрен стандартный протокол иммунофенотипирования ОЛЛ методом проточной цитометрии. Применение такого подхода позволяет получить очень высокую сопоставимость данных, получаемых в разных лабораториях. Эффективная интеграция в систему референсных лабораторий показывает высокую воспроизводимость разработанных алгоритмов диагностики ОЛЛ. Это позволит в дальнейшем применять данную диагностическую технологию в российско-белорусских многоцентровых исследованиях по терапии ОЛЛ у детей.

acute lymphoblastic leukemiaflow cytometrystandardizationострый лимфобластный лейкозпроточная цитометриястандартизацияPui C. H., Carroll W. L., Meshinchi S., Arceci R. J. Biology, risk stratification, and therapy of pediatric acute leukemias: an update. J Clin Oncol 2011;29(5):551–65. DOI: 10.1200/JCO.2010.30.7405. PMID: 21220611.Pui C. H., Mullighan C. G., Evans W. E., Relling M. V. Pediatric acute lymphoblastic leukemia: where are we going and how do we get there? Blood 2012;120(6): 1165–1174. DOI: 10.1182/blood-2012‑05‑378943. PMID: 22730540Faderl S., O’Brien S., Pui C. H. et al. Adult acute lymphoblastic leukemia: concepts and strategies. Cancer 2010;116(5):1165–76. DOI: 10.1002/cncr.24862. PMID: 20101737.Popov A. M., Verzhbitskaya T. Yu., Fechina L. G. et al. Acute leukemias: Immunophenotyping differences between blast cells and their nonneoplastic analogues in bone marrow. Klinicheskaya onkogematologiya = Clinical oncohematology 2016;9(3):302–13. (In Russ.). DOI: 10.21320/2500‑2139‑2016‑9‑3‑302‑313.Попов А. М., Вержбицкая Т. Ю., Фечина Л. Г. и др. Острые лейкозы: различия иммунофенотипа бластных клеток и их неопухолевых аналогов в костном мозге. Клиническая онкогематология 2016;9(3):302–13.Bene M. C., Castoldi G., Knapp W. et al. Proposals for the immunological classification of acute leukemias. European Group for the Immunological Characterization of Leukemias (EGIL). Leukemia 1995;9(10):1783–6. PMID: 7564526.Bene M. C., Bernier M., Casasnovas R. O. et al. The reliability and specificity of c-kit for the diagnosis of acute myeloid leukemias and undifferentiated leukemias. The European Group for the Immunological Classification of Leukemias (EGIL). Blood 1998;92(2):596–9. PMID: 9657760.Vardiman J., Thiele J., Arber D. et al. The 2008 revision of the World Health Organization (WHO) classification of myeloid neoplasms and acute leukemia: rationale and important changes. Blood 2009;114(5):937–51. DOI: 10.1182/blood-2009‑03‑209262. PMID: 17357394.Arber D., Orazi A., Hasserjian R. et al. The 2016 revision of the World Health Organization classification of myeloid neoplasms and acute leukemia. Blood 2016;127(20):2391–405. DOI: 10.1182/blood-2016‑03‑643544. PMID: 27069254.Wood B. L., Arroz M., Barnett D. et al. 2006 Bethesda international consensus recommendations on the immunophenotypic analysis of hematolymphoid neoplasia by flow cytometry: optimal reagents and reporting for the flow cytometric diagnosis of hematopoietic neoplasia. Cytometry B Clin Cytom 2007;72(Suppl. 1):S14–22. DOI: 10.1002/cyto.b.20363. PMID: 17803189.Van Dongen J. J.M., Orfao A. EuroFlow: resetting leukemia and lymphoma immunophenotyping. Basis for companion diagnostics and personalized medicine. Leukemia 2012;26(9):1899–907. DOI: 10.1038/leu.2012.121. PMID: 22948488.Kalina T., Flores-Montero J., Lecrevisse Q. et al. Quality assessment program for EuroFlow protocols: summary results of four-year (2010-2013) quality assurance rounds. Cytometry A 2015;87(2):145–56. DOI: 10.1002/cyto.a.22581. PMID: 25345353.Zueva E. E., Afanasiev B. V., Totolyan A. A. Immunophenotyping in the diagnosis of acute leukemia (lecture). Klinicheskaya laboratornaya diagnostika = Russian Clinical Laboratory Diagnostics 2004;(7):25–32 (In Russ.).Зуева Е. Е., Афанасьев Б. В., Тотолян А. А. Иммунофенотипирование в диагностике острых лейкозов (лекция). Клиническая лабораторная диагностика 2004; (7):25–32.Lugovskaya S. A., Pochtar M. E., Tupitsin N. N. Immunophenotyping in the hemoblastosis diagnosis. Tver: Triada, 2005. 186 p. (In Russ.).Луговская С. А., Почтарь М. Е., Тупицин Н. Н. Иммунофенотипирование в диагностике гемобластозов. Тверь: ООО Издательство «Триада», 2005. 168 с.Antipova A. S., Baranova O. Yu., Frenkel M. A. et al. Mixed Phenotype Acute Leukemia: Clinical and Laboratory Features, and Prognosis. Klinicheskaya onkogematologiya = Clinical oncohematology 2015;8(2):136–50 (In Russ.).Антипова А. С., Баранова О. Ю., Френкель М. А. и др. Острые лейкозы со смешанным фенотипом: клиниколабораторные особенности и прогноз. Клиническая онкогематология 2015; 8(2):136–50.Popov A. M., Verzhbitskaya T. Yu., Zueva E. E. et al. Results of external quality control study in flow cytometric acute lymphoblastic leukemia diagnostics. Onkogematologiya = Oncohematology 2016;11(3):68–75 (In Russ.).Попов А. М., Вержбицкая Т. Ю., Зуева Е. Е. и др. Результаты внешнего контроля качества диагностики острого лимфобластного лейкоза методом проточной цитометрии. Онкогематология 2016;11(3):68–75. DOI: 10.17650/1818‑8346‑2016‑11‑3‑68‑75.Popov A. M., Lagoiko S. N., Roumiantseva J. V. et al. Problems of flow cytometry immunophenotyping in Russia: Experience gained by the Reference Center of Moscow – Berlin Cooperative Clinical Group. Voprosy gematologii/onkologii i immunopatologii v pediatrii = Pediatric Hematology/ Oncology and Immunopathology 2015;14(1):58–61 (In Russ.).Попов А. М., Лагойко С. Н., Румянцева Ю. В. и др. Проблемы иммунофенотипирования в России: опыт работы референс-центра кооперированной клинической группы «Москва–Берлин». Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии 2015;14(1):58–61.Dworzak M., Buldini B., Gaipa G. et al. AIEOP-BFM consensus guidelines 2016 for flow cytometric immunophenotyping of pediatric acute lymphoblastic leukemia. Cytometry B Clin Cytometry 2018;94(1): 82–93. DOI: 10.1002/cyto.b.21518. PMID: 28187514.Fechina L., Shorikov E., Tsaur G. et al. Contribution of all-trans retinoic acid to improved early relapse-free outcome in infant acute lymphoblastic leukemia comparing to the chemotherapy alone. Blood 2007;110(11):832А. Abstr. 2828.Roumiantseva J. V., Karachunskiy A. I., Rumyantsev A. G. Optimization of childhood acute lymphoblastic leukemia therapy in Russia. Pediatriya = Pediatrics 2009;87(4):19–27. (In Russ.).Румянцева Ю. В., Карачунский А. И., Румянцев А. Г. Оптимизация терапии острого лимфобластного лейкоза у детей в России. Педиатрия 2009;87(4):19–27.Coustan-Smith E., Mullighan C. G., Onciu M. et al. Early T-cell precursor leukaemia: a subtype of very high-risk acute lymphoblastic leukaemia. Lancet Oncol 2009;10:147–156. DOI: 10.1016/S14702045(08)70314-0. PMID: 19147408.Boychenko E. G., Popov A. M., Makarova T. A. et al. Early T-cell precursor acute lymphoblastic leukemia (Review of literature and clinical case reports). Voprosy gematologii/onkologii i immunopatologii v pediatrii = Pediatric Hematology/Oncology and Immunopathology 2015;14(1):38–45 (In Russ.).Бойченко Э. Г., Попов А. М., Макарова Т. А. и др. Острый лимфобластный лейкоз из ранних предшественников Т-клеток (обзор литературы и собственные клинические наблюдения). Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии 2015;14(1):38–45.Demina I. A., Verzhbitskaya T. Yu., Kashpor S. A. et al. Heterogeneity of childhood B-cell acute lymphoblastic leukemia(EGIL subtype BIV). Onkogematologiya = Oncohematology 2017;12(4):34–40 (In Russ.). DOI: 10.17650/1818‑8346‑2017‑12‑4‑34‑40.Дёмина И. А., Вержбицкая Т. Ю., Кашпор С. А. и др. Гетерогенность Вклеточного острого лимфобластного лейкоза(BIV-иммуновариант) у детей. Онкогематология 2017;12(4):34–40